一、救脑益智胶囊对人神经母细胞瘤株SY5Y生长的影响（论文文献综述）
张景泉[1]（2017）在《开心散含药血清对Aβ诱导神经细胞损伤的作用研究》文中认为研究背景:阿尔茨海默症是一种神经退行性病变,主要病理表现为神经元细胞外淀粉样斑块沉积、神经元细胞内Tau蛋白高度磷酸化的神经纤维缠结以及神经细胞和突触数量减少。致病原因尚不明确,但Aβ假说被广泛认同,即Aβ的胞外聚集为阿尔茨海默症的主要发病原因。随着该假说的不断发展,现认为Aβ寡聚体最具毒性也是致病的最基本原因,Aβ在阿尔茨海默症患者脑中聚集,形成老年斑。在细胞水平上来说是Aβ于胞外沉积,使细胞内离子紊乱,环境稳态失衡,导致细胞凋亡。细胞凋亡的途径包括线粒体功能发生障碍,线粒体膜电位降低,膜通透性增强,导致活性氧释放增多,与细胞凋亡相关的蛋白表达有所变化,促凋亡蛋白表达上调,抗凋亡蛋白表达下调。提示Aβ损伤细胞可能通过损伤线粒体功能进而造成细胞凋亡。Aβ寡聚体由APP蛋白裂解而成,常见寡聚体有AβI-40及Aβ1-42,本实验采用Aβ25-35片段,Aβ25-35片段为Aβ142有效片段,且具备细胞毒性。开心散始见与唐代孙思邈《备急千金要方》,经近代药理研究,是治疗抑郁症等疾病的基础药物。开心散的药物组成人参、远志、石菖蒲及茯苓亦是治疗阿尔茨海默症的高频药物,进而提示开心散可以作为治疗阿尔茨海默症药物进行研究。中医认为,阿尔茨海默病的病因病机为“肾虚髓亏为本,痰瘀阻滞为标”,五脏失调,脑髓失用。传统的中药药理体外研究采用直接给药方法,但由于中药及中药复方成分复杂,以及直接给药法难以模拟体内真实环境,故提出血清药理学方法,即将中药或中药复方给动物灌服,取动物血清作为药物源进行体外实验。血清药理学方法弥补了直接给药法的不足,为中药药理的体外研究提供了新的思路。基于以上研究背景,现探讨开心散含药血清是否对Aβ25-35造成的神经细胞损伤有保护作用,且初步探讨其保护作用机制,即是否通过保护线粒体功能而发挥作用。目的:本实验通过Aβ2535损伤人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y作为研究模型,采用血清药理方法探讨开心散是否具有神经保护作用,并初步探讨可能的机制。方法:大鼠随机分为四组,分别连续灌服开心散药粉三个剂量（0.58g/Kg,1.16g/Kg,2.32g/Kg）及等量蒸馏水,连续7天,灌药量10mL/kg,每天2次。于第8日给药后1h经腹主动脉取血,静置离心,制备血清,灭活,以开心散含药血清为药物源进行实验。高效液相色谱-质谱联合检测含药血清中药物有效成分情况;SH-SY5Y细胞预先用空白鼠血清及含药鼠血清培养细胞2h,给予10μmol/LAβ25-35处理24h,然后按各实验操作进行指标检测。为探讨开心散对神经细胞的保护作用及可能的机制,采用MTT比色法检测细胞活力;Annexin V-PI染色,激光共聚焦显微镜拍照,流式细胞仪检测凋亡率检测细胞凋亡情况;激光共聚焦显微镜拍照,流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位的变化;荧光倒置显微镜拍照,流式细胞仪检测细胞内活性氧水平;Western Blot检测Bcl-2、BAX、Caspase-3、Akt1/2/3 及p-Akt 蛋白表达水平;结论:Aβ2535可通过损伤线粒体来启动细胞凋亡,最终导致神经细胞损伤。开心散可以针对线粒体,维持其内稳态,对抗细胞凋亡,从而对Aβ25-35造成的细胞损伤起到保护作用。结果:经高效液相色谱-质谱联用技术对开心散含药血清的检测中,经一级质谱图推测开心散含药血清中包括 sibiricose A5, sibiricose A6, tenuifoliside B, tenuifoliside C,tenuifolisideD,β-细辛醚,人参皂苷Rb1,人参皂苷Rh1,茯苓新酸B,茯苓新酸DM,茯苓新酸D等十种有效成分。通过实验条件筛选,Aβ2535损伤浓度为10μmol/L,细胞培养液构成为RPMI1640培养液、10%鼠血清及1%青霉素-链霉素混合溶液。且空白鼠血清及含药鼠血清对细胞没有损伤作用。MTT比色法探讨开心散含药血清对Aβ25-35所致SH-SY5Y细胞活力影响,结果显示,Aβ2535可显着降低细胞活力,而开心散可有效对抗损伤。细胞凋亡检测结果表示,Aβ2535可提高SH-SY5Y细胞凋亡率,开心散可显着降低凋亡率,抑制凋亡。活性氧检测结果显示,Aβ25-35处理后,细胞内活性氧处于高表达水平,开心散可降低细胞内活性氧水平。线粒体膜电位检测中,Aβ25-35可损伤线粒体功能,造成线粒体膜电位下降,开心散可使细胞膜电位维持相对正常的水平。Western Blot检测 Bcl-2、BAX、Caspase-3、Akt1/2/3 及 p-Akt 蛋白表达情况,Aβ25-35 可下调 SH-SY5Y细胞Bcl-2蛋白表达,p-Akt蛋白表达比率下降,上调BAX及Caspase-3蛋白表达,而开心散则可以通过增加p-Akt蛋白表达比率,上调Bcl-2蛋白表达,下调BAX及Caspase-3蛋白表达来抑制凋亡,保护细胞。
孙邈[2]（2016）在《复智胶囊及大黄素对VD大鼠海马和SH-SY5Y线粒体凋亡通路与Iκ电流关系的影响》文中研究指明近年来我们团队对复智胶囊经验方防治血管性痴呆（Vascular Dementia）进行了大量的研究工作,已知其可通过保护胆碱能系统,上调海马胆碱能系统低水平;削减缺血炎症反应对神经系统的损害;恢复脑血管循环流注,减少血小板聚集,消除氧化自由基等来预防治疗血管性痴呆。近年来研究发现钾离子通道与细胞凋亡有密切关系,尤其以延迟整流钾电流IK在凋亡中扮演重要角色,本研究将关注复智胶囊及其有效成分大黄素对线粒体凋亡通路与IK电流关系的影响。目的本研究聚焦延迟整流钾通道电流与经典的内源性线粒体凋亡通路之间的关系对细胞凋亡的影响,结合分子生物技术和基因技术,运用Western-blot、Real-time PCR和ELISA的方法检测复智胶囊对血管性痴呆大鼠海马Bcl-2、Bax及Caspase-3的影响,研究复智胶囊对血管性痴呆大鼠海马细胞凋亡的保护作用,探索复智胶囊修复神经细胞功能的可能机制;并且以神经细胞膜的离子通道特征为出发点,通过运用全细胞膜片钳技术观察复智胶囊有效成分大黄素对人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）延迟整流钾通道（IK）的作用,并探讨IK与线粒体凋亡通路的关系,望从神经元保护方面来阐明复智胶囊的拮抗凋亡机理以验证其改善血管性痴呆大鼠学习和记忆的作用;通过观察复智胶囊及大黄素对VD大鼠海马组织和SH-SY5Y细胞线粒体凋亡通路与IK电流关系的影响为复智胶囊治疗血管性痴呆提供理论及实验的可靠依据;且为进一步探讨中枢钾离子通道与血管性痴呆的关系开拓道路。方法在体实验:根据随机数字表法,将100只SD大鼠,选出正常组和假手术组各20只,剩余则使用双侧颈动脉永久结扎2-VO法,将造模成功的大鼠分为血管性痴呆VD模型组、安理申治疗组和复智胶囊治疗组,每组动物20只。各组动物连续灌药四周后进行相应的指标检测。本实验使用Morris水迷宫的方法对各组大鼠进行行为学检测,观测其学习记忆能力;采用酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）测定各组大鼠血清中的Cleaved Caspase-3表达;采用Real-time PCR的方法检测各组大鼠脑海马组织中Bcl-2和Bax的mRNA基因变化水平;采用Western blot的方法测定各组大鼠脑海马组织中Bcl-2,Bax,Caspase-3和Cleaved Caspase-3的蛋白表达水平。离体试验:细胞常规培养人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y,通过建立细胞生长曲线确定本实验所需细胞密度,通过MTT比色法检测复智胶囊有效成分大黄素细胞毒性实验确定本实验大黄素加药浓度,将SH-SY5Y细胞随机分为空白对照组、糖氧剥夺OGD组、糖氧剥夺OGD+大黄素（Xμmol/L）治疗组,使用全细胞膜片钳技术描记对照组、模型组和大黄素组IK的变化,绘制I-V曲线。结果我们的结果显示:（1）与正常对照组相比,VD模型组大鼠脑海马组织中凋亡抑制基因Bcl-2表达降低,而促凋亡基因Bax表达升高,Bcl-2/Bax的比值变小;通过复智胶囊或安理申的干预则可降低VD大鼠脑海马组织中的促凋亡基因Bax,并且升高凋亡抑制基因Bcl-2,通过改变Bcl-2/Bax的比值来起到对抗细胞凋亡的作用。（2）与正常对照组相比,VD模型组大鼠脑海马组织中的Caspase-3和Cleaved Caspase-3明显过表达,而通过复智胶囊或安理申的干预,可降低VD大鼠脑海马组织中的Caspase-3和Cleaved Caspase-3,以改善VD所造成的脑组织损害。（3）SH-SY5Y经过糖氧剥夺后呈现缺糖缺氧状态,细胞存活率显着下降,此现象可在加入复智胶囊有效成分大黄素后被逆转,提示复智胶囊有效成分大黄素对SH-SY5Y细胞缺糖缺氧损伤后生长和活力状态具有保护作用。（4）糖氧剥夺OGD组与空白对照相比,IK电流密度明显减弱。复智胶囊有效成分大黄素则可逆转此抑制作用,在指令电压为+50 mV时IK峰密度值分别从（4.474±0.4182）pA/pF增大至（5.947±0.7415）pA/pF（P<0.05,n=15）（5）复智胶囊有效成分大黄素可使被OGD抑制的IK电流-电压曲线（I-V）慢慢上升,并且伴随着的去极化幅度的逐步升高而越来越大。结论1、在体实验显示复智胶囊可以抑制促凋亡基因Bax的表达,下调凋亡执行者Caspase-3的表达,并且上调凋亡抑制基因Bcl-2的表达,说明基于经典的线粒体凋亡通路,复智胶囊可启动抗凋亡机制,以达到对血管性痴呆的神经元保护作用。2、膜片钳的数据结果说明复智胶囊主要成分对SH-SY5Y延迟整流钾通道IK的峰值及电压电流（I-V）曲线有较为显着的激活作用,说明复智胶囊主要成分可以通过激活IK电流,减少细胞内钙离子堆积来抑制线粒体凋亡通路的启动。以上结果提示我们复智胶囊可能通过对IK电流的激活和抗凋亡机制来治疗血管性痴呆。
杨佳[3]（2016）在《谷氨酰胺诱导HSP70表达促进α-突触核蛋白在SH-SY5Y细胞中的降解》文中进行了进一步梳理目的：帕金森氏病是一种神经退行性病变,其病理基础之一是α-突触核蛋白的聚集。目前有研究证明,HSP70高表达可以使α-突触核蛋白成为无毒的非聚集形式。对于防止甚至逆转帕金森氏病中α突触核蛋白引起的毒性,Hsp70是一个有效的治疗靶点,而谷氨酰胺被认为可以诱导热休克蛋白表达。本研究主要是在SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞中,首先研究了谷氨酰胺对HSP70表达水平的影响,其次研究了谷氨酰胺提高HSP70表达中HSF-1的作用,之后构建α突触核蛋白高表达的SH-SY5Y细胞,研究谷氨酰胺在α突触核蛋白的降解中的调节作用。方法：1.在SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞中,研究谷氨酰胺对Hsp70表达的影响在体外和体内的实验证明谷氨酰胺能够安全地提高热休克蛋白的表达。本研究是在SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞中研究谷氨酰胺对热休克蛋白表达的调控,科研假设是Hsp70在α突触核蛋白的降解中起到关键的调节作用。首先,在谷氨酰胺治疗后的SH-SY5Y细胞中,通过定量PCR方法测定Hsp70表达的mRNA水平,应用蛋白印记分析（Western blot analysis）测定Hsp70蛋白表达水平。通过谷氨酰胺治疗剂量上的不同,研究不同治疗剂量的谷氨酰胺对Hsp70表达的影响。通过不同的谷氨酰胺治疗时间,研究在SH-SY5Y细胞的中,时间对Hsp70表达的影响。2在SH-SY5Y细胞中,研究谷氨酰胺引起的Hsp70上调与HSF-1之间的关系热休克因子绑定在目标序列热休克元素上,该元素位于热启动子诱导基因中促进了热休克蛋白的表达,包括Hsp70。为了明确在SH-SY5Y田胞中谷氨酰胺促进Hsp70表达的信号通路,接下来我们研究了HSF-1敲除在谷氨酰胺对Hsp70表达上的作用。在SH-SY5Y细胞中,首先采用RNAi技术敲除HSF-1的表达,之后用定量PCR检测siRNA-HSF-1转染对HSF-1mRNA水平的影响,使用Western blot技术检测siRNA-HSF-1转染对HSF-1蛋白水平的影响。3 在SH-SY5Y细胞中,研究α-突触核蛋白过表达对Hsp70和HSF-1表达的影响3.1构建α-突触核蛋白过表达的SH-SY5Y细胞克隆热休克蛋白功能缺陷被认为在PD中发挥关键作用。其中Hsp70是研究最多的分子伴侣,其在PD中负相调节α-突触核蛋白的聚集及α-突触核蛋白诱导的细胞毒性。为了探索由谷氨酰胺引起的Hsp70表达上调对α突触核蛋白的降解的影响,我们构建了一个SH-SY5Y细胞克隆,其过表达野生型α-突触核蛋白,即SH-SY5Y （SYN+）将野生型α-突触核蛋白的编码序列克隆到真核表达载体pcDNA3.1 （+）.通过定量PCR方法观察SH-SY5Y （SYN+）细胞中α-突触核蛋白mRNA水平的表达,通过Western blot分析检测SH-SY5Y （SYN+）细胞中α-突触核蛋白的蛋白表达水平。3.2 α-突触核蛋白过表达对HSP70和HSF-1表达的影响为了进一步探讨高表达的α-突触核蛋白对HSP70表达及HSF-1的表达是否有影响,我们通过定量PCR的方法分别对HSP70和HSF-1在mRNA水平进行了检测,并进行比较；通过Western blot的方法分别检测了HSP70和HSF-1的蛋白水平,并进行比较。4在SH-SY5Y （Syn+）细胞中,研究谷氨酰胺诱导的Hsp70对α-突触核蛋白的影响首先,在SH-SY5Y （SYN+）细胞中,通过定量PCR方法,研究谷氨酰胺对α-突触核蛋白mRNA表达水平的调控。然后在SH-SY5Y （SYN+）细胞中,使用Western blotting的方法,检测谷氨酰胺治疗后α-突触核蛋白的蛋白水平。并且为了研究谷氨酰胺剂量对α-突触核蛋白表达的影响,我们比较了4mM、8 mM和16mM的谷氨酰胺之间α-突触核蛋白的蛋白水平。此外,在SH-SY5Y （SYN+）细胞中,我们研究了给予谷氨酰胺（8mM）治疗时,HSF-1敲除对α-突触核蛋白合成的影响。结果：1.在SH-SY5Y细胞中,谷氨酰胺上调了Hsp70的表达在SH-SY5Y细胞中,首先,在谷氨酰胺治疗后,通过定量PCR方法测定了Hsp70 mRNA水平上的表达。与未治疗组相比较,谷氨酰胺（4-16 mM）治疗24小时后显着上调了Hsp70的mRNA表达水平。并且在mRNA水平上,Hsp70表达呈谷氨酰胺剂量依赖性,在4mM和8mM组之间或8mM和16mM组之间比较,Hsp70的mRNA水平有显着的差异。谷氨酰胺上调Hsp70的表达也呈时间依赖性。经12小时4mM的谷氨酰胺治疗后,Hsp70的表达是上调的,24小时后达到峰值,并且12小时治疗与24小时治疗的有明显的差别。谷氨酰胺4到16mM治疗24小时后,亦促进了Hsp70的蛋白表达水平。因此,在SH-SY5Y细胞中,谷氨酰胺上调了Hsp70的表达。2在SH-SY5Y细胞中,谷氨酰胺引起的Hsp70上调呈HSF-1依赖性采用RNAi技术沉默HSF-1表达,在SH-SY5Y细胞中,经过8mM谷氨酰胺治疗,HSF-1特异性siRNA （siRNA-HSF-1）,显着下调了HSF-1的mRNA表达水平。通过转染siRNA-HSF-1,HSF-1蛋白水平也下调了。更重要的是,与siRNA control转染细胞相比,不论在蛋白表达还是在mRNA水平,Hsp70也明显下调。因此,我们确认谷氨酰胺促进Hsp70的表达是HSF-1依懒性的。3 α-突触核蛋白在SH-SY5Y细胞中过表达不影响Hsp70和HSF-1的表达3.1成功构建了一个过表达野生型α-突触核蛋白的SH-SY5Y细胞克隆,即SH-SY5Y（SYN+）。将野生型-α突触核蛋白的编码序列克隆到真核表达载体pcDNA3.1（+）。α-SYN过表达的SH-SY5Y细胞克隆在含G418的完全培养基中筛选。在SH-SY5Y（SYN+）细胞中可检测到明显较高且稳定的α-突触核蛋白mRNA水平而在蛋白水平,在SH-SY5Y（SYN+）细胞中,通过Western blot分析表明α-突触核蛋白表达也明显上调。此外,α-SYN过表达在细胞传代的每一代间没有明显变化。3.2为了进一步探讨高表达的α-突触核蛋白对HSP70和HSF-1的影响,我们对Hsp70和HSF-1在mRNA水平蛋白水平的表达进行定量检测。Figure 3A-D表明Hsp70和HSF-1不论是mRNA水平还是蛋白水平,在转染cat-pcDNA3.1（+）的SH-SY5Y细胞和SH-SY5Y（Syn+）细胞之间并没有明显差别。因此,α-Syn过表达的SH-SY5Y（Syn+）细胞是稳定的,可以用以研究Hsp70对α-Syn降解的影响。4通过谷氨酰胺上调表达的Hsp70增加了α-突触核蛋白在SH-SY5Y（Syn+）细胞的降解首先,通过定量PCR,在mRNA水平研究了谷氨酰胺对α-突触核蛋白表达的调控,经过6到12小时治疗后在SH-SY5Y（SYN+）细胞中,8mM谷氨酰胺对α-突触核蛋白的mRNA水平没有影响。然后我们研究了在SH-SY5Y（SYN+）细胞中,经过谷氨酰胺治疗后的α-突触核蛋白的蛋白水平。图4B显示经谷氨酰胺治疗24小时后,降低了α-突触核蛋白的蛋白水平,与内参β-actin比较。α-突触核蛋白的减少呈谷氨酰胺剂量依赖性,在4 mM和8 mM组间有显着性差异,在8mM和16mM组之间有显着性差异。此外,HSF-1敲除后,给予谷氨酰胺（8mM）治疗,结果表明通过谷氨酰胺治疗,与对照组相比,25或50 nMsiRNA-HSF-1均抑制了α-Syn的减少。因此,我们证实,谷氨酰胺治疗促进了α-突触核蛋白在SH-SY5Y（SYN+）细胞中的降解,但是如果HSF-1敲除后,谷氨酰胺促进降解的作用就被抑制。结论：1.在SH-SY5Y细胞中,经谷氨酰胺治疗后,Hsp70的表达上调,表现在Hsp70的mRNA表达水平及蛋白水平均上调,而且在mRNA表达水平上呈现谷氨酰胺剂量依赖性及治疗时间的依赖性；2在SH-SY5Y细胞中,谷氨酰胺引起的Hsp70上调呈HSF-1依赖性；3在α-Syn过表达的SH-SY5Y（Syn+）细胞,过表达的α-突触核蛋白并不影响Hsp70和HSF-1的表达,因此,α-Syn过表达的SH-SY5Y（Syn+）细胞是稳定的,可以用以研究谷氨酰胺、Hsp70和HSF-1对α-突触核蛋白降解的影响；4通过谷氨酰胺上调的Hsp70表达增加了α-突触核蛋白在SH-SY5Y （Syn+）细胞的降解,因此可以考虑以此为靶点治疗帕金森氏病。
张景燕,张静爽,曹子青,赵志炜,张旭,吴燕川,王玉兰,王蓉[4]（2015）在《救脑益智方剂水提液对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞的保护作用》文中研究表明目的通过观察复方中药救脑益智方剂水提液对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞生长以及胰岛素信号通路的影响,探讨其对神经细胞保护作用的机制。方法体外培养SH-SY5Y细胞,分为对照组（C组）、救脑益智1号方组和3号方组,每组药物剂量分别为0.0625 mg/m L、0.125 mg/m L、0.25 mg/m L、0.5 mg/m L和1 mg/m L,测定各组细胞的噻唑蓝（MTT）代谢率,选定0.125 mg/m L进行细胞免疫荧光染色,观察细胞形态和胰岛素受体底物-1（IRS-1）、c AMP反应元件结合蛋白（CREB）表达的变化。结果与对照组相比,救脑益智组MTT代谢率升高（P<0.05）,细胞形态好,表现为细胞胞体饱满、贴壁良好、突起延长,IRS-1和CREB表达增加。结论复方中药救脑益智水提液能促进神经细胞生长,提高神经元胰岛素信号通路相关因子IRS-1和CREB表达,推测其神经保护作用机制与胰岛素信号通路有关。
胡文军,邓朝晖,李国锋[5]（2012）在《复方脑康胶囊对β-淀粉样肽诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用研究》文中提出目的:研究复方脑康胶囊对β-淀粉样肽（Aβ）25-35（Aβ25-35）诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用。方法:将SH-SY5Y细胞接种后分为对照、Aβ25-35（25μmol.L-1）和复方脑康胶囊（0.725g.mL-1）+Aβ25-35（25μmol.L-1）组。通过测定细胞存活率（MTT法）、乳酸脱氢酶（LDH）漏出率、细胞轴突长度、胞体面积,观察复方脑康胶囊对Aβ导致神经毒性的保护作用。结果:与对照组比较,Aβ25-35组SY5Y细胞的轴突长度和胞体面积均较小,MTT代谢率降低,LDH漏出率升高,而加入复方脑康胶囊水提液后,可使上述指标恢复或接近正常。结论:复方脑康胶囊具有神经保护作用,可减轻Aβ导致的神经毒性。
孙亚彬,胡文军,李国锋[6]（2011）在《复方脑康胶囊对β-淀粉样肽诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用》文中研究表明目的研究复方脑康胶囊对β-淀粉样肽诱导人神经母细胞瘤株细胞株（SH-SY5Y）模型细胞凋亡的保护作用。方法将SH-SY5Y细胞接种后分为正常对照组、Aβ25-3525μmol/L损伤组和Aβ25-3525μmol/L加0.725g/mL复方脑康胶囊水提液保护组。以测定细胞存活率（MTT法）、乳酸脱氢酶（LDH）漏出率、细胞轴突长度、胞体面积为观察指标,观察复方脑康胶囊对β-淀粉样肽（β-amyloid,Aβ）导致神经毒性的保护影响。结果与正常对照组相比,Aβ25-35组SY5Y细胞的轴突长度和胞体面积均较小,MTT代谢率降低,LDH漏出率升高,而加入复方脑康胶囊保护后,可使上述指标恢复或接近正常。结论复方脑康胶囊具有神经保护作用,可减轻Aβ导致的神经毒性。
涂明珠,肖移生,胡国柱,李明,刘莹莹,张瑜,黎艳刚,杨武亮[7]（2010）在《枳壳活性成分对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y生长的影响》文中研究表明目的:探讨枳壳醇提有效部位及其所含部分单体成分对人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y生长的影响。方法:将细胞分为不同给药组,给以枳壳醇提有效部位及其所含的川陈皮素、红橘素、伞形酮和葡萄内酯不同浓度的试药,以四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定细胞的活力,分析药物对SH-SY5Y细胞生长的作用。结果:红橘素和伞形酮在实验浓度下对SH-SY5Y细胞生长无显着性影响;枳壳醇提有效部位、川陈皮素和葡萄内酯在实验浓度下对SH-SY5Y细胞生长有显着性影响,且呈浓度效应关系。结论:枳壳醇提有效部位、葡萄内酯和川陈皮素对神经细胞生长有保护作用。
张景燕,孟艳,王蓉,姬志娟,盛树力[8]（2008）在《PI3K特异性抑制剂Wortmannin和APP17肽对SY5Y细胞胰岛素信号转导通路的作用》文中研究指明目的利用PI3K的特异性抑制剂Wortmannin阻断体外培养的人神经母细胞瘤株SY5Y细胞的存活信号转导通路,观察β淀粉样肽前体蛋白（APP）17肽对SY5Y细胞生长的影响及其作用机制。方法体外培养SY5Y细胞,分为对照组、Wortmannin组、APP17肽组、APP17肽+Wortmannin组、葡萄糖组、葡萄糖+APP17肽组、葡萄糖+Wortmannin+APP17肽组,观察各组细胞的噻唑蓝（MTT）代谢率、乳酸脱氢酶（LDH）漏出率、细胞轴突长度、胞体面积。结果（1）APP17肽可促进SY5Y细胞MTT代谢率升高、LDH漏出率降低、细胞轴突长度和胞体面积增加,但经Wortmannin作用后,其作用减弱。（2）APP17肽对高糖环境下的SY5Y细胞也有上述作用,且经Wortmannin作用后其作用减弱。结论APP17肽能通过激活胰岛素的PI3K信号转导通路发挥其神经保护作用。
孟艳,张景艳,王蓉,盛树力[9]（2008）在《人神经母细胞瘤株SY5Y细胞PI3’K信号转导通路的研究》文中研究表明目的利用磷酸腺肌醇-3蛋白激酶（PI3’K）的特异性抑制剂Wortmannin阻断体外培养的人神经母细胞瘤株SY5Y细胞的信号转导通路,通过观察胰岛素对SY5Y生长的影响,研究其作用机制。方法体外培养SY5Y细胞,分为2大组,第1组包括:对照组、5mmol/L葡萄糖组、5mmol/L葡萄糖加胰岛素0.01U/mL组、5mmol/L葡萄糖加Wortmannin加胰岛素组;第2组包括:对照组、11.5mmol/L葡萄糖组、11.5mmol/L葡萄糖加胰岛素0.01U/mL组、11.5mmol/L葡萄糖加Wortmannin加胰岛素组。观察每组细胞的噻唑蓝（MTT）代谢率、乳酸脱氢酶（LDH）漏出率、细胞轴突长度和胞体面积,并进行统计学分析。结果胰岛素可使正常和高糖环境下SY5Y细胞MTT代谢率升高、LDH漏出率降低、SY5Y细胞轴突长度和胞体面积增加,但经Wortmannin作用后,其作用减弱。结论SY5Y细胞表面存在胰岛素受体,胰岛素通过激活SY5Y细胞的PI3’K信号转导通路发挥其神经保护作用。
姚洁,张景艳,姬志娟,王蓉,盛树力[10]（2006）在《短肽N328-332对人神经母细胞瘤株SY5Y生长的影响》文中进行了进一步梳理目的:分析淀粉样β蛋白前体蛋白N端328-332对人神经母细胞瘤株SY5Y生长的影响,在体外寻找具有神经营养作用、促进神经细胞生长的最适浓度,为进一步细胞损伤的保护及药物体内研究提供理论依据。方法:细胞分组:根据实验目的不同,分组处理如下:第一步分为对照组、短肽N328-3322.5,5,10,20,40,80,160μmol/L组。第二步分为对照组、短肽N328-33240μmol/L组。以MTT代谢率测定细胞存活率以筛选肽对神经细胞生长促进的最佳有效浓度。以MTT代谢率测定细胞存活率、细胞计数观察细胞增长情况、乳酸脱氢酶漏出率观察细胞死亡率和WesternBlotting检测P-CREB、Bcl-2表达水平为观察指标,分析短肽N328-332对人神经母细胞瘤株SY5Y生长的影响。结果:①从10μmol/L起,短肽N328-332即对SY5Y细胞生长有促进作用,其最小有效浓度为20μmol/L,40μmol/L促进作用最强,80μmol/L开始作用减弱,故选用40μmol/L浓度作为以下试验浓度。②短肽N328-33240μmol/L加药组代表细胞存话率的A值高于对照组,组间比较差异有显着性意义(0.9741±0.0047,0.6001±0.0019,P<0.01。③短肽N328-33240μmmol/L加药组乳酸脱氢酶漏出率明显低于对照组,组间比较差异有显着性意义(84.9135±31.5759,199.6252±40.7273,P<0.01。④从接种第4天始,短肽N328-332组SY5Y细胞数增加,与对照组相比,差异有显着性意义（P<0.05）。⑤短肽N328-33240μmol/L组P-CREB、Bcl-2蛋白表达高于对照组（37424.08±83.59,34957.24±78.03,19110.24±45.80,2761.36±58.61,P<0.05）。结论:短肽N328-332对SY5Y细胞具有神经营养作用,40μmol/L浓度,效果优于其他浓度。
二、救脑益智胶囊对人神经母细胞瘤株SY5Y生长的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、救脑益智胶囊对人神经母细胞瘤株SY5Y生长的影响（论文提纲范文）
（1）开心散含药血清对Aβ诱导神经细胞损伤的作用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 缩略词中英对照 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 1. 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 试剂与仪器 |
| 2.1.1 主要试剂 |
| 2.1.2 主要仪器 |
| 2.1.3 动物 |
| 2.2 方法 |
| 2.3 统计学方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 高效液相色谱-质谱联用检测开心散含药血清主要成分 |
| 3.2 鼠血清对SH-SY5Y细胞活力的影响 |
| 3.3 开心散含药血清对SH-SY5Y细胞活力的影响 |
| 3.4 Aβ_(25-35)诱导SH-SY5Y细胞损伤 |
| 3.5 开心散含药血清对Aβ_(25-35)损伤SH-SY5Y细胞活力影响 |
| 3.6 SH-SY5Y形态学观察 |
| 3.7 开心散含药血清对Aβ_(25-35)致SH-SY5Y细胞凋亡的影响 |
| 3.8 开心散含药血清对Aβ_(25-35)致SH-SY5Y细胞内活性氧生成的影响 |
| 3.9 开心散含药血清对Aβ_(25-35)致SH-SY5Y细胞线粒体膜电位的影响 |
| 3.10 开心散含药血清对Aβ_(25-35)致SH-SY5Y细胞Bcl-2、BAX、Caspase-3、p-Akt及Akt1/2/3蛋白表达的影响 |
| 附图 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（2）复智胶囊及大黄素对VD大鼠海马和SH-SY5Y线粒体凋亡通路与Iκ电流关系的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 中英文缩略词表 |
| 第一部分 文献综述 |
| 综述一 从肾论治血管性痴呆的中医药研究进展 |
| 1 从肾论治血管性痴呆的中医理论依据 |
| 2 从肾论治血管性痴呆的现代医学认识 |
| 3 马云枝教授治疗血管性痴呆的经验述评 |
| 4 局限与展望 |
| 参考文献 |
| 综述二 Bcl-2和Caspase在缺血性脑损伤线粒体凋亡通路中的重要角色 |
| 1 细胞凋亡和缺氧缺血性脑损伤 |
| 2 线粒体通路在缺血性脑损伤神经元凋亡中具有调控作用 |
| 3 局限与展望 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 第二部分 实验研究 |
| 实验一 复智胶囊对VD模型大鼠线粒体凋亡通路的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 实验二 复智胶囊主要成分大黄素对 SH-SY5Y 缺糖缺氧损伤的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 实验三 复智胶囊有效成分大黄素对SH-SY5Y缺糖缺氧后I_κ的影响 |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结语 |
| 创新点 |
| 存在问题与不足 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 附录一 造模方法选择 |
| 附录二 阳性药选择 |
| 附录三 Morris水迷宫图 |
| 致谢 |
| 在学期间主要研究成果 |
| 个人简历 |
（3）谷氨酰胺诱导HSP70表达促进α-突触核蛋白在SH-SY5Y细胞中的降解（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 主要缩略语与符号 |
| 前言 |
| 第一部分 在SH-SY5Y神经母细胞瘤细胞中谷氨酰胺上调Hsp70的表达 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 统计学分析 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 第二部分 α-Syn过表达SH-SY5Y细胞的构建及鉴定 |
| 引言 |
| 材料 |
| 方法 |
| 结果 |
| 统计学分析 |
| 讨论 |
| 第三部分 SH-SY5Y(SYN+)细胞中谷氨酰胺对α突触核蛋白的影响 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 统计学分析 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 参考文献 |
| 攻博期间发表的科研成果 |
| 致谢 |
（4）救脑益智方剂水提液对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞的保护作用（论文提纲范文）
| 1 材料和方法 |
| 1. 1实验材料 |
| 1. 2 实验方法 |
| 1. 3 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2. 1 MTT 代谢率测定 |
| 2. 2 细胞免疫荧光染色 |
| 3 讨论 |
（5）复方脑康胶囊对β-淀粉样肽诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用研究（论文提纲范文）
| 1 仪器与材料 |
| 1.1 仪器 |
| 1.2 试药 |
| 1.3 细胞株 |
| 2 方法[3, 4] |
| 2.1 SH-SY5Y细胞的培养 |
| 2.2 药物试验浓度的确定 |
| 2.3 LDH漏出率测定 |
| 2.4 MTT法测定细胞存活率 |
| 2.5 形态学观察 |
| 2.6 统计学方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 LDH漏出率测定结果 |
| 3.2 细胞存活率测定结果 |
| 3.3 形态学观察结果 |
| 4 讨论 |
（7）枳壳活性成分对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y生长的影响（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 细胞 |
| 1.1.2 药物 |
| 1.1.3 试剂 |
| 1.1.4 仪器 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 细胞培养 |
| 1.2.2 细胞给药分组 |
| 1.2.3 MTT法检测 |
| 1.2.4 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 枳壳醇提有效部位对SY5Y细胞生长的影响 |
| 2.2 川陈皮素对SY5Y细胞生长的影响 |
| 2.3 红橘素对SY5Y细胞生长的影响 |
| 2.4 伞形酮对SY5Y细胞生长的影响 |
| 2.5 葡萄内酯对SY5Y细胞生长的影响 |
| 3 讨论 |
（8）PI3K特异性抑制剂Wortmannin和APP17肽对SY5Y细胞胰岛素信号转导通路的作用（论文提纲范文）
| 材料与方法 |
| 一、材料 |
| 二、方法 |
| 1. MTT代谢率测定: |
| 2. LDH漏出率测定: |
| 3.形态学观察: |
| 三、统计学处理 |
| 结 果 |
| 一、MTT代谢率 |
| 二、LDH漏出率 |
| 三、形态学结果 |
| 讨 论 |
（9）人神经母细胞瘤株SY5Y细胞PI3’K信号转导通路的研究（论文提纲范文）
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1) MTT代谢率测定: |
| 2) LDH漏出率测定: |
| 3) 形态学观察: |
| 1.3 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 MTT代谢率测定 |
| 2.2 LDH漏出率测定 |
| 2.3 形态学观察 |
| 1) 在5 |
| 2) 11.5 mmol/L葡萄糖对SY5Y细胞有损伤作 |
| 3 讨论 |
四、救脑益智胶囊对人神经母细胞瘤株SY5Y生长的影响（论文参考文献）
- [1]开心散含药血清对Aβ诱导神经细胞损伤的作用研究[D]. 张景泉. 北京中医药大学, 2017(03)
- [2]复智胶囊及大黄素对VD大鼠海马和SH-SY5Y线粒体凋亡通路与Iκ电流关系的影响[D]. 孙邈. 北京中医药大学, 2016(04)
- [3]谷氨酰胺诱导HSP70表达促进α-突触核蛋白在SH-SY5Y细胞中的降解[D]. 杨佳. 武汉大学, 2016(08)
- [4]救脑益智方剂水提液对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y细胞的保护作用[J]. 张景燕,张静爽,曹子青,赵志炜,张旭,吴燕川,王玉兰,王蓉. 中国比较医学杂志, 2015(04)
- [5]复方脑康胶囊对β-淀粉样肽诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用研究[J]. 胡文军,邓朝晖,李国锋. 中国药房, 2012(07)
- [6]复方脑康胶囊对β-淀粉样肽诱导SH-SY5Y细胞凋亡的保护作用[A]. 孙亚彬,胡文军,李国锋. 2010年广东省药师周大会论文集, 2011
- [7]枳壳活性成分对人神经母细胞瘤株SH-SY5Y生长的影响[J]. 涂明珠,肖移生,胡国柱,李明,刘莹莹,张瑜,黎艳刚,杨武亮. 江西中医学院学报, 2010(03)
- [8]PI3K特异性抑制剂Wortmannin和APP17肽对SY5Y细胞胰岛素信号转导通路的作用[J]. 张景燕,孟艳,王蓉,姬志娟,盛树力. 中国糖尿病杂志, 2008(07)
- [9]人神经母细胞瘤株SY5Y细胞PI3’K信号转导通路的研究[J]. 孟艳,张景艳,王蓉,盛树力. 首都医科大学学报, 2008(02)
- [10]短肽N328-332对人神经母细胞瘤株SY5Y生长的影响[J]. 姚洁,张景艳,姬志娟,王蓉,盛树力. 中国临床康复, 2006(26)