一、干细胞与生物自保护（论文文献综述）
庞云[1]（2011）在《人脐带胶质间充质干细胞的分离培养与特性研究》文中研究表明细胞治疗已经走过十多年的历程,起初科学家对免疫细胞进行大量研究,如细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）治疗癌症具有可观的前景;而目前科学界对人脐带间充质干细胞（Human umbilical cord mesenchymal stem cell, hUC-MSC）的研究较为关注,由于hUC-MSC比胚胎干细胞（ESC）、骨髓间充质干细胞（BM-MSC）等具有更好的临床应用潜能,从而成为人类再生医学和组织工程的研究热点。本研究目的是探索更有效的hUC-MSC分离培养方法和进一步研究hUC-MSC生物学特性,通过建立优化的实验方法,能为再生医学科研和临床应用提供操作规范标准和参考依据。方法:实验随机选取足月顺产健康胎儿脐带,采取手工机械分离法和3种酶组合消化法从脐带胶质中释放人脐带间充质细胞;并用优化完全培养基纯化培养;MTT法检测各代脐带间充质细胞生长增殖活性并绘制生长曲线;流式细胞术检测脐其生长周期和表面标志物;RT-PCR扩增基因P53、C-myc和OCT-4;结果:培养脐带间充质细胞形态为梭形、呈纤维样,并出现流水状或漩涡样生长;生长增殖速度较快,第7代脐带间充质细胞指数倍增时间小于30h;80%以上细胞处于G0/G1期;培养脐带间充质细胞均一稳定高表达CD29、CD70、CD105、CD90和CD44,而几乎不表达CD45、CD34和HLA-DR;P53基因在各代脐带间充质细胞均有表达,C-myc基因在第4代和第18代出现明显表达,OCT-4基因在不同代数均出现表达;结论:1)1h可分离30cm脐带胶质,获得的大量脐带间充质细胞（9×104/cm）,经培养检测证明具有hUC-MSC的形态特征、增殖活性,表面抗原一致,是原始的hUC-MSC;2)通过RT-PCR检测各代脐带间充质细胞的P53、C-myc和OCT-4基因,发现培养10代以内hUC-MSC状态较正常。本研究意义:提示在临床应用hUC-MSC时,对其癌基因和抑癌基因全面检测以及衰老凋亡系统检测很有必要;本实验可为短期培养扩增出临床治疗所需要安全可靠的MSC提供研究基础,可为避免hUC-MSC体内移植治疗产生致瘤性提供参考依据。
郑学芝,刘桂莲,李丽,孙卫,念红,胡静,蔡子微[2]（2007）在《RNA干扰Nucleostemin基因对人食管癌Eca-109细胞株增殖影响的实验研究》文中研究指明目的筛选NS基因特异性siRNA阳性细胞克隆,研究NS基因特异性RNA干扰对Eca-109细胞株体外增殖能力的影响。方法用脂质体法将NS特异性siRNA表达载体转染Eca-109细胞,Zeocin抗生素压力筛选后用PCR方法鉴定阳性克隆;MTT法检测各组细胞的生长增殖情况,RT-PCR方法检测NS基因表达量的变化情况。结果与对照组比较,silencer组肿瘤细胞趋于分化,细胞增殖抑制率超过80%（P<0.01）,差异具有显着性;NS基因表达量下降。结论NS基因特异性RNA干扰抑制人食管癌Eca-109细胞株体外增殖,使NS基因表达量下降。
蔡子微[3]（2003）在《生物自保护、自保护生物学与自保护医学》文中进行了进一步梳理
蔡子微[4]（2002）在《干细胞与生物自保护》文中研究指明目的 :探讨干细胞与生物自保护的关系及其研究意义。方法 :以干细胞的现代研究为基础 ,从自保护生物学角度探讨干细胞与生物自保护的关系及其研究意义。结果 :认为干细胞是生物自保护的一种形式 ,具有重要的生物自保护作用 ,其涉及生物的生长发育、组织更新、损伤修复以及抗损伤能力等诸多领域。结论 :干细胞与生物自保护关系密切 ,这方面的研究具有重要的意义
蔡于微[5]（2000）在《自保护生物学与保护医学》文中指出
二、干细胞与生物自保护（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、干细胞与生物自保护（论文提纲范文）
（1）人脐带胶质间充质干细胞的分离培养与特性研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 引言 |
| 1.1 MSC 的来源发展 |
| 1.2 hUC-MSC 的分离及培养 |
| 1.3 hUC-MSC 的生物学特性 |
| 1.4 hUC-MSC 的诱导分化能力 |
| 1.5 hUC-MSC 的临床应用基础研究 |
| 1.6 立题依据及研究内容 |
| 2 实验材料和方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验标本 |
| 2.1.2 主要试剂及配制 |
| 2.1.2.1 主要试剂 |
| 2.1.2.2 主要试剂配制 |
| 2.1.3 主要仪器 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 手工机械分离联合酶消化法分离脐带间充质细胞并培养 |
| 2.2.2 脐带间充质细胞扩增培养方法 |
| 2.2.3 脐带间充质细胞冻存及复苏 |
| 2.2.3.1 脐带间充质细胞冻存 |
| 2.2.3.2 脐带间充质细胞复苏 |
| 2.2.4 脐带间充质细胞生物学特性鉴定 |
| 2.2.4.1 脐带间充质细胞形态学观察 |
| 2.2.4.2 脐带间充质细胞生长曲线实验 |
| 2.2.4.3 流式细胞术检测脐带间充质细胞的表面标志 |
| 2.2.4.4 流式细胞术检测脐带间充质细胞周期 |
| 2.2.4.5 RT-PCR 检测脐带间充质细胞P53、C-myc 和OCT-4 基因的表达 |
| 2.2.4.5.1 细胞总 RNA 提取 |
| 2.2.4.5.2 测提取 RNA 的浓度 |
| 2.2.4.5.3 提取的 RNA 逆转录成cDNA |
| 2.2.4.5.4 设计各基因引物 |
| 2.2.4.5.5 PCR 扩增检测各因子基因 |
| 2.2.4.5.5.1 按表3 向 PCR 管中加入反应试剂 |
| 2.2.4.5.5.2 设置 PCR 循环反应条件并扩增 |
| 2.2.4.5.5.3 凝胶成像鉴定 PCR 产物 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 脐带间充质细胞镜下形态学观察 |
| 3.2 脐带间充质细胞的生长曲线绘制 |
| 3.3 流式细胞术检测分析脐带间充质细胞周期 |
| 3.4 流式细胞术检测脐带间充质细胞表面标志 |
| 3.5 脐带间充质细胞的 RT-PCR 结果 |
| 3.5.1 脐带间充质细胞 RNA 的浓度 |
| 3.5.2 RNA 反转录成cDNA 的检测 |
| 3.5.3 扩增脐带间充质细胞各代的 P53、C-myc 和 OCT-4 基因 |
| 4 讨论 |
| 4.1 原代hUC-MSC 的分离 |
| 4.2 hUC-MSC 的基本特性鉴定 |
| 4.3 hUC-MSC 的癌基因及抑癌基因扩增检测 |
| 5 实验结论及意义 |
| 6 本论文创新之处 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
（2）RNA干扰Nucleostemin基因对人食管癌Eca-109细胞株增殖影响的实验研究（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 细胞培养及NS基因转染 |
| 1.2.2 阳性细胞克隆的鉴定 |
| 1.2.3 生长曲线的绘制[3] |
| 1.2.4 细胞的形态学观察 |
| 1.2.5 MTT比色法测定细胞增殖抑制率[3] |
| 1.2.6 各组肿瘤细胞NS基因表达水平检测 |
| 1.2.7 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 PCR法鉴定阳性细胞克隆 |
| 2.2 细胞生长曲线的绘制 |
| 2.3 各组细胞的形态学变化 |
| 2.4 MTT比色法测定细胞增殖能力 |
| 2.5 各组肿瘤细胞NS基因表达水平 |
| 3 讨论 |
四、干细胞与生物自保护（论文参考文献）
- [1]人脐带胶质间充质干细胞的分离培养与特性研究[D]. 庞云. 内蒙古农业大学, 2011(11)
- [2]RNA干扰Nucleostemin基因对人食管癌Eca-109细胞株增殖影响的实验研究[J]. 郑学芝,刘桂莲,李丽,孙卫,念红,胡静,蔡子微. 肿瘤防治研究, 2007(02)
- [3]生物自保护、自保护生物学与自保护医学[J]. 蔡子微. 牡丹江医学院学报, 2003(06)
- [4]干细胞与生物自保护[J]. 蔡子微. 牡丹江医学院学报, 2002(06)
- [5]自保护生物学与保护医学[J]. 蔡于微. 牡丹江医学院学报, 2000(04)