bFGF对晚期周围神经再生的电生理评价

bFGF对晚期周围神经再生的电生理评价

一、bFGF对晚期周围神经再生作用的电生理评价(论文文献综述)

侯晓峰[1](2013)在《嗅鞘细胞移植修复脊髓损伤》文中研究指明背景:脊髓损伤后导致损伤平面以下的运动、感觉及自主神经功能障碍,其修复一直是神经科学研究领域的一大难题。目的:对嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的可能机制及在实验研究、临床应用等方面进行分析,探讨其对脊髓神经功能恢复的作用。方法:回顾性分析以往嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的实验基础研究和临床研究的状况,分析嗅鞘细胞移植后的存活数量和时间与损伤脊髓结构和功能的恢复关系,明确限定临床研究入选病例及排除病例的标准,明确移植细胞的来源、类型及植入方法,建立客观有效的评估标准。结果与结论:嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤动物实验已经取得了满意的效果,脊髓功能评分及感觉与运动功能均较移植前明显提高(P<0.001),动物实验中成功的经验为临床试验和应用提供了依据,部分临床试验最长患者随访5年,但因临床研究病例数较少,随访期短,到目前还不能判断其大宗病例的最终恢复程度,还需要进一步观察和研究。但这一研究结果的重要意义有助于找到合理的策略,使嗅鞘细胞发挥最大的修复效果。

马富凯[2](2013)在《胶原结合碱性成纤维细胞生长因子联合胶原支架促进坐骨神经横断伤修复研究》文中研究指明研究背景和目的周围神经损伤(PNI)是当今社会中一个常见的问题。它常常导致患者功能的丧失,影响患者的生活质量。由于产伤、车祸或暴力伤等引起的周围神经损伤会导致感觉或运动神经元的变性坏死。尽管周围神经有再生的能力,但其功能恢复很不理想。根据神经损伤的程度、严重性、缺损的长度及轴突再生所需的时间的不同,功能的恢复程度也不同。在人类和哺乳动物动物,轴突的再生速度很慢(1或3毫米/天)。在临床上,根据神经纤维的损伤和神经连续性的丧失程度不同,周围神经损伤常分为3类:(1)神经压伤(有或无去髓鞘化)。(2)轴突断伤(但神经内膜和神经束膜保留)。(3)神经横断伤(神经内膜、束膜的连续性被破坏)。神经损伤后轴突再生和髓鞘化可能对功能的恢复有帮助。人工神经研究的不断发展,有力地促进了神经轴突的再生和功能恢复。近几年的研究发现,人们在可降解或不可降解的神经导管材料研究中取得了一些进展。然而它们尚存在一定的局限性使得人们继续探索更有效的策略以促进周围神经损伤再生。胶原材料在组织工程中是较好的材料之一。胶原材料因其低免疫原性和较好的可降解性而被广泛应用于组织再生。在本研究中,我们使用胶原导管来连接坐骨神经近远两断端间的缺损,从而起到桥接作用,有序胶原材料(LOCS)填充于神经导管中,共同组成神经损伤修复胶原生物材料。前期的研究表明,神经以不正确的方式生长可能导致再生的神经失去功能。我们实验室之前的研究证实有序胶原材料(LOCS)是一种新型的神经引导材料。除此之外,有序胶原材料还可以被用来结合神经营养因子或作为携带药物的载体。另一方面,在周围神经系统中生长因子对促进神经生长起重要作用。其中碱性成纤维细胞生长因子是一种重要的生长因子,它能促进轴突再生,对于施万细胞,体内和体外的研究证实碱性成纤维细胞生长因子能刺激施万细胞的增殖。然而,应用碱性成纤维细胞生长因子溶液体内应用后因为其半衰期短、在体液冲刷后大量扩散,因而并不能取得满意的治疗效果。为了在治疗部位达到有效的药物浓度,周期性注射用药或大剂量给药是常用的方法。但这样的方法会招致感染或严重的副作用。因此,我们将胶原结合区融合在碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的一端从而构建了CBD-bFGF。CBD-bFGF与胶原有较强的亲和力,同时与bFGF有相同的生物活性。随后,将CBD-bFGF与有序胶原材料特异结合以控制它的释放速度。目的:在本研究中,我们将改造的CBD-bFGF.有序胶原材料和胶原导管联合应用从而构建出一种天然的功能生物材料,随后我们将此功能生物材料用于大鼠坐骨神经5毫米缺损的横断伤中,以促进神经再生。方法(1) CBD-bFGF和天然碱性成纤维细胞生长因子(NAT-bFGF)的制备。使用我们实验室之前的方法。将CBD-bFGF的基因序列用PCR扩增出来并插入到pET-28a质粒中。将该质粒转入到BL21(DE3)大肠杆菌中。随后,用IPTG诱导蛋白的表达。用琼脂糖镍柱从上清中将目的蛋白纯化出来。使用相同的方法将天然碱性成纤维细胞生长因子构建出来。用Bradfod法测量蛋白的浓度。(2)有序胶原材料和胶原管的准备。有序胶原材料来源于牛筋膜。胶原管来源于胶原膜。将胶原膜卷在模子上并交联,将胶原管用NaH2PO4和蒸馏水洗干净后冻干。将有序胶原材料切成5毫米长,胶原管切成7毫米长并辐照除菌。将CBD-bFGF、NAT-bFGF和PBS分别加在有序胶原材料上。(3)外周神经损伤动物模型制备。将所有的雄性大鼠分为3组,包括神经缺损用胶原管和LOCS+CBD-bFGF连接(LOCS+CBD-bFGF组);神经缺损用胶原管和LOCS+NAT-bFGF连接(LOCS+NAT-bFGF组);神经缺损用胶原管和LOCS+PBS连接(LOCS+PBS组)。使用戊巴比妥钠腹腔注射将大鼠麻醉。将大鼠右侧的坐骨神经暴露,剪去神经干3毫米,由于神经的回缩而造成5毫米的缺损。随后将携带因子的有序胶原材料填充于胶原导管并用9/0的尼龙线将导管缝在神经的两断端。在胶原管移植治疗后的第六和第十二周用腹腔注射过量麻药的方法将大鼠处死。(4)行走足迹分析。使用Bain的方法计算坐骨神经功能指数,记录下白纸上大鼠脚印并通过公式计算SFI值。(5)电生理评价。在第十二周,大鼠被麻醉后,重新暴露出再生的坐骨神经。将钩状的双刺激电极放在神经近端,两刺激电极放在神经的近远两端,用电生理仪记录神经传导速度。(6)荧光金逆行示踪。在第十周将大鼠麻醉。重新暴露坐骨神经,将荧光金注射在神经的远端,分层缝合后将大鼠饲养两周,在第十二周时处死。将大鼠L4到L6的背根神经节取出做冰冻切片。在荧光显微镜下计数发出金黄色荧光的感觉神经元。(7)在第六和第十二周,取出大鼠新生神经,固定后做石蜡切片。将切片用来做免疫组化。使用的一抗为NF和S-100,用软件统计NF和S-100的阳性面积比(阳性面积/总面积)。一些切片被用来做坚牢蓝染色,统计新生神经的数量和直径,通过做透射电镜来观察髓鞘的厚度。一些新生神经通过做HE染色来观察轴突再生的有序结构。(8)腓肠肌恢复率和马松三色染色。我们测量了腓肠肌重量恢复率。大鼠被处死后双侧的腓肠肌被分离并在电子天平上称得湿重。通过患侧肌肉重量与健侧肌肉重量的比值测得腓肠肌恢复率。之后将腓肠肌做石蜡切片并做马松三色染色。统计肌肉的阳性面积比(肌肉面积/总面积)。统计学处理文章中所使用的统计学方法为多样本间多重比较中的S-N-K法。所使用的统计学软件为SPSS13.0。将统计后的数据表示为均数±标准误。将P值<0.05或P<0.01视为统计学上差别有统计学意义。并且在本文中的表达为*P<0.05或**P<0.01。结果(1)神经导管的概况。第十二周时,神经缺口被有效地连接起来。胶原管被吸收了,被类似神经的组织所代替。新生神经与周围组织间没有发现严重的粘连。(2)行走足迹分析。坐骨神经功能指数在-100到0之间,0代表正常神经功能。-100代表神经功能的完全丧失。在第四周前,三组之间没有显着性差异。从第五周开始,坐骨神经功能指数在各组间的差别有统计学意义。其中坐骨神经功能指数在LOCS+NAT-bFGF组的值要高于LOCS+PBS组,但坐骨神经功能指数在LOCS+NAT-bFGF组的值要低于LOCS+CBD-bFGF组。(3)电生理学评价。我们发现在第12周各组的大鼠恢复到了不同的程度。神经传导速度在LOCS+CBD-bFGF组和LOCS+NAT-bFGF组要比LOCS+PBS组要快。同时神经传导速度在LOCS+CBD-bFGF组和LOCS+NAT-bFGF组之间的差别有统计学意义。(4)荧光金逆行示踪。在术后第12周。荧光金所标记的背根神经节感觉神经元在紫外激发下呈现出金黄色。在各组将被标记的感觉神经元计数。统计学结果显示用LOCS+CBD-bFGF处理的组感觉神经纤维的恢复要比LOCS+NAT-bFGF组和LOCS+PBS组好。被标记的感觉神经元的数量在LOCS+NAT-bFGF组要比LOCS+PBS组高。(5)组织和形态学分析。通过HE染色。我们发现在有序胶原材料的引导下,三个组(LOCS+CBD-bFGF组、LOCS+NAT-bFGF组、LOCS+PBS组)的神经再生均呈现出有序的结构。为了评价新生神经的再生轴突的数量和分布。在第6周和第12周,我们用NF一抗做了免疫组化。LOCS+CBD-bFGF组显示了最好的轴突的恢复,而在LOCS+PBS组只显示了稀少的NF的阳性面积。各组间的差别有统计学意义。S-100染色可以评价再生神经施万细胞的增殖情况,施万细胞的增殖对轴突的再生非常重要。定量分析显示,在第6周和第12周,S-100的阳性面积比在LOCS+CBD-bFGF组要高于LOCS+NAT-bFGF组和LOCS+PBS组。而且与LOCS+PBS组相比,LOCS+NAT-bFGF组的阳性面积比较高。(6)髓鞘分析。坚牢蓝染色后我们对再生神经的数量和直径进行了分析。在第6周和第12周,再生神经的数量和直径从LOCS+PBS组到LOCS+NAT-bFGF组再到LOCS+CBD-bFGF组出现递增的趋势,但是在第6周时,再生神经的数量和直径的差别没有统计学意义。通过透射电镜,我们分析了髓鞘厚度。LOCS+NAT-bFGF组的厚度比LOCS+PBS组高但比LOCS+CBD-bFGF组低。(7)肌肉重量检测和马松三色染色。与LOCS+NAT-bFGF组和LOCS+PBS组相比,LOCS+CBD-bFGF组的恢复率要比前两组高。但是腓肠肌恢复率在LOCS+NAT-bFGF组和LOCS+PBS组之间的差别无统计学意义。我们分析了肌肉阳性面积比例,LOCS+CBD-bFGF组、LOCS+NAT-bFGF组、LOCS+PBS组之间差别有统计学意义。肌肉阳性面积比在正常肌肉最高,在LOCS+PBS组最低。同时肌肉阳性面积比在LOCS+CBD-bFGF组要高于LOCS+NAT-bFGF组。结论在本研究中,胶原管、有序胶原材料和基因工程改造的碱性成纤维细胞生长因子被联合应用并构建成一个生物功能材料,该功能材料各组分在大鼠坐骨神经5毫米缺损的横断伤模型中起到了协同作用。与NAT-bFGF相比,由于CBD-bFGF能与胶原结合在治疗部位形成了较高浓度,因此能更有效地促进神经再生和功能的恢复。该功能生物材料用于周围神经损伤的修复将是一个有效的策略。

周嫱[3](2012)在《推拿对坐骨神经损伤大鼠生长相关蛋白表达影响的研究》文中研究指明[目的]基于推拿治疗坐骨神经损伤具有良好的临床疗效,从实验角度探寻坐骨神经损伤经推拿治疗后,机体在感觉功能及运动功能方面的改善效应,并通过对背根神经节中生长相关蛋白表达变化的研究,进一步揭示推拿治疗坐骨神经损伤的起效机理及作用途径。[方法]以SD大鼠为实验动物,制备坐骨神经夹持损伤模型,选取患侧殷门穴、承山穴、阳陵泉穴,每天用按摩手法模拟仪于以上三穴施以揉法、点法和拨法,通过对其斜板试验和足底部光热耐痛阈的检测,从行为学角度探寻坐骨神经损伤经推拿治疗后肢体运动功能和感觉功能的恢复情况;通过观察背根神经节脊髓、坐骨神经以及腓肠肌HE染色的变化,从形态学角度探寻推拿对神经元再生修复的促进效应;通过检测背根神经节及腓肠肌中生长相关蛋白表达的变化,探寻推拿促进损伤神经再生修复的机制,揭示推拿治疗坐骨神经损伤的起效机理和作用途径。[结果]1.行为学造模7天后,模型组大鼠的斜板试验结果下降,与正常组比较具有统计学意义。推拿治疗10天后,推拿治疗组斜板试验结果高于模型组、模型对照组,趋于正常。推拿治疗可以使坐骨神经损伤大鼠腓肠肌肌力明显改善,促进其运动功能的恢复。造模7天后,模型组大鼠右侧足底部光热耐痛阈升高,与正常组比较有统计学意义。推拿治疗10天后,推拿治疗组大鼠右侧足底部光热耐痛阈明显低于模型组,高于正常组,与模型组有统计学意义。推拿治疗可以提高坐骨神经损伤大鼠的痛觉敏感程度,促进其感觉功能的恢复。2.病理学正常情况下,背根神经节HE染色可见其神经元多数呈圆形,胞质呈嗜酸性,体积较大;胞核呈嗜碱性,染色浅,大而圆;核仁清楚,胞体外周有卫星细胞包绕;脊髓HE染色可见脊髓腹角细胞胞核位于细胞中央,尼氏体均匀分布。通过对模型组的观察,DRG内部分神经元出现中央染色质溶解的现象,神经元有不同程度的坏死,细胞出现肿胀、变形和溶解的现象,胞浆的染色不均匀,细胞的形态也大小不一;脊髓HE染色显示细胞出现肿胀、胞核移向边缘尼氏体溶解消失等变性现象。说明坐骨神经损伤后,会导致背根神经节和脊髓腹角运动神经元胞体死亡。通过对推拿治疗组的观察,DRG内神经元形状渐规则,大多为圆形,细胞肿胀及变形的现象不明显;脊髓腹角神经元部分细胞核移向边缘,部分细胞核位于中央,尼氏体溶解,细胞排列在完整性、方向性等方面好于模型组和模型对照组。说明推拿对坐骨神经损伤后感觉神经元和运动神经元的修复具有一定的促进作用。3.生长相关蛋白正常组及假手术组大鼠GAP-43在背根神经节及腓肠肌中有少量的表达,阳性的胞浆呈浅棕褐色,胞核呈淡蓝色;神经损伤7天后,模型组及模型对照组大鼠GAP-43在背根神经节及腓肠肌中的表达情况较正常组染色加深,免疫组化平均光密度增高,存在差异;推拿治疗10天后,模型组及模型对照组大鼠GAP-43在背根神经节及腓肠肌中的免疫组化平均光密度较正常组有一定程度增高,推拿治疗组大鼠GAP-43在背根神经节及腓肠肌中免疫组化平均光密度显着增高,染色程度和范围明显优于模型组,表达情况更为明显,较其余四组均存在差异。说明推拿治疗可以促进GAP-43在背根神经节及腓肠肌中的表达。[结论]推拿可以提高坐骨神经损伤大鼠的痛觉敏感程度,提高患侧腓肠肌的肌力及肌肉恢复率,从而促进坐骨神经损伤大鼠运动功能和感觉功能的恢复;其作用途径为对背根神经节感觉神经元及脊髓腹角运动神经元的营养和保护;起效机理之一为促进背根神经节及腓肠肌中生长相关蛋白的表达以促进损伤神经的再生修复,为损伤神经提供良好的微环境。

李志辉[4](2012)在《hNT-4基因修饰嗅鞘细胞结合组织工程技术治疗周围神经损伤的研究》文中研究表明目的:1、研究体外高纯度Wistar乳鼠嗅鞘细胞(OECs)的培养方法;2、研究OECs与壳聚糖支架的组织相容性;3、构建组织工程人工神经桥接Wistar大鼠10mm臂丛神经缺损,研究此人工神经桥接体的修复效果及这些促神经再生因素之间的相互作用。方法:1、用差速贴壁法和化学抑制剂法进行分离培养OECs:取3-5天的Wistar乳鼠嗅球,两次差速贴壁分离培养,阿糖胞苷抑制成纤维细胞生长,NGFRp75免疫组化染色计算OECs纯度;2、观察嗅鞘细胞与壳聚糖的生物相容性:将传代培养的嗅鞘细胞分别接种至壳聚糖包被的培养板(实验组)和未处理的培养板(对照组)上进行培养,应用DAPI荧光染色法检测细胞存活和增殖状况;3、将制备的组织工程化人工神经移植进行神经缺损修复实验:以臂丛神经损伤的Wistar大鼠为动物模型,实验动物随机分为4组。A组:壳聚糖导管(桥接)+hNT4-OECs组;B组:自体神经移植组;C组:壳聚糖导管(桥接)组;D组:阴性对照组。于术后6、12周,应用电生理检测、HE染色、免疫荧光染色观察嗅鞘细胞的存活、表达及周围神经结构、功能的恢复情况。结果:1、经NGFRp75免疫组织化学染色鉴定结果表明成功分离、培养OECs,细胞纯度达95%以上;2、OECs与壳聚糖支架的组织相容性:正常对照组和实验组各时点凋亡细胞的百分率经比较差异无显着性(P>0.05);3、大体观察:术后动物均出现不同程度的足底溃疡、患肢屈曲挛缩及拖曳步态,恢复情况以A、B组最好,C组次之,D组最差,6周以后有所改善,12周后大鼠处死,壳聚糖管吸收完全;4、电生理检测:A组与C组、D组神经传导速度(NCV)和神经动作电位振幅(AMP)比较均有统计学意义(P<0.05),A组、B组比较无统计学意义(P>0.05);5、组织学观察:神经损伤后12周的恢复情况明显优于6周,A组、B组神经纤维粗大、排列整齐,包裹较厚髓鞘;C组神经纤维排列稀疏呈波浪形,内可见新生毛细血管及少量胶原纤维;D组神经纤维紊乱分布,胶原组织较多。组织切片显示在12周时A组神经损伤处仍有GFP荧光表达,表明嗅鞘细胞在人工神经内仍然存活。结论:1、应用差速贴壁加化学抑制剂法可得到数量较大,纯度较高的OECs;2、壳聚糖导管具有良好生物相容性,可以作为神经桥接管;3、用壳聚糖制作三维支架,以hNT-4基因转染的OECs为种子细胞,构建成的组织工程化人工神经,修复神经缺损,其修复效果接近于自体神经移植,相对于单纯应用壳聚糖神经导管修复神经缺损可进一步提高神经修复的效果,具有广阔的应用前景,值的进一步研究。

吴鹏[5](2011)在《丝素蛋白纳米纤维直径对嗅鞘细胞生长和迁移影响的研究》文中提出目的探讨不同直径丝素蛋白纳米纤维(silk fibroin nanofibers,SFS)对嗅鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)生长及迁移的影响,为脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)修复材料的选择提供实验基础和理论依据。方法(1)SFS的制备:运用静电纺丝技术制备SFS,并通过扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)观察。(2)OECs的纯化培养:取SD大鼠嗅球新鲜分离的OECs,采用改良差速贴壁法纯化培养。(3) OECs与SFS的复合培养:将纯化后的OECs分别接种至以左旋多聚赖氨酸(poly-l-lysine,PLL)(对照组)和SFS(400nm,1200nm)(实验组)包被盖玻片的培养皿中进行复合培养。(4)检测指标:复合培养不同时间点行倒置相差显微镜和扫描电镜观察细胞形态、生长、分布及与材料黏附情况。神经生长因子受体p75(nerve growth factor receptor p75,NGFR p75)及胶质原纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)免疫荧光染色测定细胞表现型,噻唑兰(Thiazoyl Blue Tetrazolium Bromide,MTT)法测定支架材料上OECs的增殖情况,死活细胞染色试剂及流式细胞术检测细胞生存率,细胞的迁移通过Leica AF6000活细胞工作站拍摄得到图像,活细胞工作站动态跟踪观察OECs生长迁移并计算细胞迁移轨迹、迁移行为、迁移效率、迁移速率。结果(1)倒置相差显微镜示SFS上培养的OECs与对照组相比,细胞沿丝素纤维迁移,细胞突起方向走向较一致,形态特征无显着差异。(2)扫描电镜观察显示SFS平均直径约为(395±3)nm、(1210±7)nm,纤维呈三维立体网状结构,分布均匀,OECs与材料结合紧密,且细胞突起方向与纤维走向较一致,形态与对照组无显着性差异。(2)免疫荧光染色:培养4d时,免疫荧光染色显示实验组NGFRp75/GFAP阳性,OECs在SFS材料上仍保留其特有的表现型。(3)MTT检测显示:培养第4d时,对照组OECs的吸光度值较1200nm直径的材料OECs的吸光度值有显着差异(p<0.05),培养第7d时,对照组OECs的吸光度值较实验组吸光度值有显着差异(p<0.05),而且OECs在400nmSFS材料上的吸光度值比在1200nmSFS材料上的吸光度值高,有统计学意义(p<0.05)。400nmSFS相比1200nmSFS更能促进OECs的增殖。(4)死活细胞染色试剂检测显示:在培养第4、7天时,实验组细胞形态较对照组正常,成活率较高,两组死亡细胞数比较无显着性差异。(5)流式细胞术检测结果显示:在培养第4天时,实验组OECs较对照组OECs的凋亡率无显着差异(p>0.05)。(6)活细胞工作站观察显示:细胞的迁移速率,迁移效率和对照组相比均无显着地统计学差异(p>0.05),两种直径的SFS对OECs在纤维上的迁移速率、迁移效率没有显着影响。结论不同直径丝素蛋白纳米纤维对嗅鞘细胞的生长与迁移均具有支持和引导作用,SFS有望成为一种新型的组织工程支架材料结合OECs移植修复脊髓损伤。

李军,魏开斌[6](2010)在《OECs修复SCI的研究进展》文中提出

胡志俊,马迎辉[7](2009)在《嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展》文中提出脊髓损伤的治疗一直是医学界的难题。脊髓损伤后神经元轴突再生困难,同时神经胶质瘢痕阻碍再生轴突的通过。嗅鞘细胞是一种特殊的神经胶质细胞,具有中枢神经系统(CNS)星形胶质细胞和外周雪旺氏细胞的特性,许多基础与临床研究发现嗅鞘细胞是神经系统中具有促进神经轴突再生,引导轴突正确生长的独特细胞,取得了一定的成果,为脊髓损伤的修复带来了希望。

程凯力[8](2008)在《电针对急性脊髓损伤大鼠48h一氧化氮及钙离子作用的机理研究》文中指出本论文分文献综述和实验研究两部分。第一部分文献综述文献综述共两篇。第一篇着重介绍了近年来国内外对脊髓损伤的认识及其治疗的进展,主要从中医和西医治疗二方面进行评述。第二篇回顾了针灸治疗脊髓损伤的临床和实验研究概况。第二部分动物实验目的:探讨电针对急性脊髓损伤保护作用的机理。方法:大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、药物组、电针组,用改良Allen’s打击法制成脊髓损伤模型,损伤48h后取材。(1)运动联合计分法(CBS)综合评定大鼠脊髓损伤后的神经功能;(2)测定损伤后血清及损伤局部组织钙离子含量;(3)测定损伤后血清及损伤局部组织一氧化氮含量。结果:损伤48h后,(1)与模型组比较,药物组和电针组的CBS分值有极显着性差异(P<0.01);(2)和空白组及假手术组比较,模型组、电针组和药物组的血清和脊髓组织中的钙离子及一氧化氮的含量都显着上升;(3)电针组和药物组血清及脊髓组织中的钙离子和一氧化氮的含量较模型组显着降低(P<0.01)。结论:电针对脊髓损伤的治疗作用可能是通过降低钙离子及一氧化氮含量,纠正钙超载和一氧化氮所引发的一系列生化反应,来发挥电针对脊髓组织的保护作用。了解电针后钙离子和一氧化氮介导的信号转导途径对于深入研究电针抗脊髓损伤机制具有重要意义。

代丽丽,任铭奎,吴锦生[9](2007)在《电生理检测在同种异体神经移植处植入bFGF复合降解膜研究中的应用》文中研究表明周围神经损伤造成神经缺损是临床常见的外伤,自体神经移植已成为一种主要的解决方法,但是由于神经再生不全影响功能恢复,特别是移植的自体神经来源有限,供区局部

任铭奎,代丽丽[10](2007)在《碱性成纤维细胞生长因子复合缓释降解膜对同种异体移植神经的影响:电生理评价》文中研究表明目的:应用电生理检测指标评价碱性成纤维细胞生长因子复合缓释降解膜对周围神经再生的影响。方法:实验于2005-03/11在沈阳医学院奉天医院实验室完成。①实验材料:碱性成纤维细胞生长因子复合缓释降解膜:主要成分为碱性成纤维细胞生长因子、维生素C抑制剂、明胶、壳聚糖。②实验分组:大耳白兔60只,按随机数字表法分为实验组和对照组,每组30只。异体正中神经制备:每组兔分6次取正中神经,每次取5只兔的正中神经,分别切除双侧正中神经各2.5cm,用受体动物血浆浸泡20min、-196℃液氮冷存21d、室温下复温。手术方法:麻醉后暴露双侧上臂正中神经主干,在相应一致神经部位切除2.5cm,用复温后的异体正中神经缝接。实验组神经缝接处包裹碱性成纤维细胞生长因子复合缓释降解膜,对照组不包膜。③实验评估:术后8,13,26周采用Keypoint肌电诱发电位仪测定运动神经传导速度和复合肌肉动作电位波幅。采用Luzex-F图像分析仪测定移植神经近段和远段的锇酸髓鞘染色横断面标本上有髓神经纤维数量。结果:①运动神经传导速度:术后8,13,26周实验组运动神经传导速度明显快于对照组[分别为(21.62±2.81),(13.16±1.81)m/s;(40.83±3.66),(21.71±2.40)m/s;(50.41±4.84),(31.96±3.17)m/s],两组间差异有非常显着性意义(t=3.51,3.69,3.88,P<0.001)。②复合肌肉动作电位波幅:术后8,13,26周实验组复合肌肉动作电位波幅则明显高于对照组[分别为(1.47±0.16),(0.83±0.07)mV;(4.82±1.27),(2.66±0.31)mV;(14.55±4.16),(8.63±3.36)mV],两组间差异有显着性意义(t=2.34,2.48,2.66,P<0.05)。③有髓神经纤维数量:实验组术后13周神经近段和远段有髓神经纤维比例为2.5∶1,术后26周比例为1.2∶1;而对照组相应时间点有髓神经纤维比例分别为7.2∶1和2.2∶1。结论:神经传导速度和复合肌肉动作电位波幅检测结果提示碱性成纤维细胞生长因子复合缓释降解膜有促进周围神经再生的作用。

二、bFGF对晚期周围神经再生作用的电生理评价(论文开题报告)

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、bFGF对晚期周围神经再生作用的电生理评价(论文提纲范文)

(1)嗅鞘细胞移植修复脊髓损伤(论文提纲范文)

0 引言
1 资料和方法
    1.1 资料来源
    1.2 入选标准
    1.3 质量评估
2 嗅鞘细胞移植修复脊髓损伤
    2.1嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的实验基础研究
        2.1.1嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的国外实验基础研究
        2.1.2嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的国内实验基础研究
    2.2嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的临床研究
        2.2.1嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的国外临床研究
        2.2.2嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的国内临床研究
    2.3影响嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的预后因素
        2.3.1嗅鞘细胞移植数量对其治疗脊髓损伤的预后影响
        2.3.2不同时间移植嗅鞘细胞对损伤脊髓功能恢复的影响
        2.3.3嗅鞘细胞移植到损伤脊髓的存活时间
        2.3.4嗅鞘细胞移植对脊髓损伤3种神经营养因子表达的影响
3 结论
    作者贡献:
    利益冲突:
    伦理要求:
    作者声明:

(2)胶原结合碱性成纤维细胞生长因子联合胶原支架促进坐骨神经横断伤修复研究(论文提纲范文)

摘要
ABSTRACT
第一章 前言
    1.1 周围神经损伤概述
    1.2 自体神经移植
    1.3 神经导管的应用
    1.4 细胞治疗
    1.5 生长因子
第二章 改造的碱性成纤维细胞生长因子联合胶原支架促进坐骨神经横断伤修复
    2.1 引言
    2.2 材料与方法
第三章 实验结果
    3.1 制备的材料
    3.2 大鼠造模和再生概况
    3.3 坐骨神经功能指数
    3.4 电生理测试
    3.5 逆行示踪
    3.6 形态和组织学观察
    3.7 再生神经的髓鞘分析
    3.8 腓肠肌恢复率和马松三色染色
第四章 讨论
第五章 结论
参考文献
缩写词简表
致谢
硕士研究生期间发表论文情况

(3)推拿对坐骨神经损伤大鼠生长相关蛋白表达影响的研究(论文提纲范文)

中文摘要
ABSTRACT
缩略语
文献综述
    综述一 坐骨神经损伤的研究进展
        坐骨神经损伤的中医学研究概况
        1 痹证的概念
        2 痿证的概念
        3 经筋的涵义
        4 临床治疗
        5 作用机理
        坐骨神经损伤的现代医学研究概况
        1 概述
        2 病因及临床表现
        3 临床治疗
        4 作用机理
        参考文献
    综述二 生长相关蛋白与损伤神经再生修复的关系
        1 生长相关蛋白的分布及表达变化机制
        2 生长相关蛋白的生理作用
        参考文献
    综述三 推拿治疗坐骨神经损伤的研究概况
        1 推拿治疗坐骨神经损伤的临床报道
        2 推拿治疗坐骨神经损伤的修复机理
        参考文献
前言
实验研究
    材料和方法
        实验一、推拿治疗坐骨神经损伤大鼠的行为学评价
        实验二、推拿治疗坐骨神经损伤大鼠的病理学研究
        技术路线图
    结果
    讨论
    参考文献
    结论
致谢
个人简历
附件
    附件一、背根神经节HE染色
    附件二、背根神经节GAP-43免疫组化染色
    附件三、腓肠肌HE染色
    附件四、腓肠肌GAP-43免疫组化染色

(4)hNT-4基因修饰嗅鞘细胞结合组织工程技术治疗周围神经损伤的研究(论文提纲范文)

摘要
Abstract
插图和附表清单
缩略语表
1 前言
2 试验材料与方法
    2.1 试验材料
    2.2 试验方法
    2.3 数据处理和统计学方法
3 试验结果与分析
    3.1 体外培养 OECs 的形态学观察及鉴定
    3.2 OECs 转染 hNT-4 基因过表达慢病毒载体
    3.3 OECs 与壳聚糖组织相容性实验的研究
    3.4 臂丛神经离断大鼠模型建立与桥接
4 讨论
5 结论
参考文献
综述
    参考文献
作者简介
致谢

(5)丝素蛋白纳米纤维直径对嗅鞘细胞生长和迁移影响的研究(论文提纲范文)

中文摘要
Abstract
序言
    参考文献
第一部分 不同直径丝素蛋白纳米纤维对嗅鞘细胞生长影响的研究
    1 实验材料
    2 实验方法
    3 结果
    4 讨论
    参考文献
第二部分 不同直径丝素蛋白纳米纤维对嗅鞘细胞迁移引导作用的研究
    1 实验材料
    2 实验方法
    3 结果
    4 讨论
    参考文献
结论
综述
    参考文献
中英文对照缩略词表
攻读学位期间公开发表的论文
致谢

(6)OECs修复SCI的研究进展(论文提纲范文)

1 OECs的生物学特性
2 OECs移植修复SCI的实验基础研究
3 OECs移植修复SCI的临床实验研究
4 OECs新的移植方法
    4.1 OECs联合移植
        4.1.1 OECs联合神经干细胞移植
        4.1.2 OECs联合胚胎干细胞移植
        4.1.3 其它联合移植
    4.2 基因修饰的OECs移植
5 OECs修复SCI的可能机制
    5.1 OECs的神经营养作用
    5.2 OECs膜表面粘附分子的作用
    5.3 OECs的成髓鞘作用及其机制
6 OECs移植存在的问题和展望

(7)嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展(论文提纲范文)

1 OECs促进SCI后神经修复的生物学特点
    1.1 改变SCI损伤的局部微环境
    1.2 促进轴突和髓鞘的再生
    1.3 抑制胶质瘢痕的形成
    1.4 帮助神经轴突穿越瘢痕
2 OECs移植治疗SCI的实验基础研究
    2.1 国外
    2.2 国内
3 OECs移植治疗SCI临床研究
    3.1 国内
    3.2 国外
4 OECs移植治疗SCI的展望

(8)电针对急性脊髓损伤大鼠48h一氧化氮及钙离子作用的机理研究(论文提纲范文)

中文摘要
英文摘要(Abstract)
缩略词表
综述一 脊髓损伤治疗的进展
    1. 中医对脊髓损伤的认识
        1.1 对脊髓损伤症状的认识
        1.2 对脊髓损伤病因病机的认识
    2. 西医对脊髓损伤的认识
    3. 脊髓损伤的治疗
        3.1 脊髓损伤的中医治疗
        3.1.1 针灸治疗
        3.1.2 推拿加功能训练
        3.1.3 中药治疗
        3.2 脊髓损伤的西医治疗
        3.2.1 脊髓损伤的手术治疗
        3.2.2 脊髓损伤的移植治疗
        3.2.3 基因治疗
        3.2.4 生物材料的应用
        3.2.5 脊髓损伤的药物治疗
    4. 小结
    参考文献
综述二 电针治疗急性脊髓损伤的研究
    1. 临床治疗
        1.1 截瘫症
        1.2 疼痛
        1.3 痉挛
        1.4 泌尿系统疾病
        1.5 小结
    2. 实验研究
        2.1 电流的作用
        2.2 血流量和最佳治疗时间
        2.3 脊髓诱发电位
        2.4 对脊髓损伤后微环境的影响
        2.5 对神经再生的影响
    3. 总结
    参考文献
第二部分 实验研究
    1. 材料与方法
        1.1 实验动物及分组
        1.2 造模
        1.3 治疗
    2. 运动联合计分法评价电针对大鼠脊髓损伤后行为学的研究
        2.1 运动联合计分法(combined behavioral scores ,CBS)
        2.2 统计方法
        2.3 CBS计分结果
    3. 电针对大鼠脊髓损伤后血清中和局部组织内钙离子含量的研究
        3.1 仪器和药品
        3.2 钙离子测定方法
        3.3 统计方法
        3.4 结果
    4. 电针对大鼠脊髓损伤后血清中和局部组织内 NO含量的研究
        4.1 仪器和药品
        4.2 动物灌注固定与取材
        4.3 数据处理方法
        4.4 结果
第三部分 分析和讨论
    1. 电针对脊髓损伤大鼠模型及神经功能的评价
        1.1 脊髓损伤动物模型的制备
        1.2 脊髓损伤动物神经功能的评定
        1.3 脊髓损伤实验研究存在的问题与展望
    2. 电针对脊髓损伤大鼠血清和脊髓钙离子含量的影响
    3. 电针对脊髓损伤大鼠血清和脊髓NO含量的影响
    4. 钙离子和一氧化氮在脊髓损伤中的相互关系
    5. 结论
    6. 结语
参考文献
致谢
个人简历

(10)碱性成纤维细胞生长因子复合缓释降解膜对同种异体移植神经的影响:电生理评价(论文提纲范文)

0 引言
1 材料和方法
2 结果
    2.1 肉眼观察皮肤愈合良好, 从神经移植段光滑程度看, 实验组明显优于对照组。
    2.2 两组兔术后不同时间点运动神经传导速度和复合肌肉动作电位波幅比较见表1。
    2.3 两组兔术后不同时间点有髓神经纤维数量比较
3讨论

四、bFGF对晚期周围神经再生作用的电生理评价(论文参考文献)

  • [1]嗅鞘细胞移植修复脊髓损伤[J]. 侯晓峰. 中国组织工程研究, 2013(31)
  • [2]胶原结合碱性成纤维细胞生长因子联合胶原支架促进坐骨神经横断伤修复研究[D]. 马富凯. 南方医科大学, 2013(03)
  • [3]推拿对坐骨神经损伤大鼠生长相关蛋白表达影响的研究[D]. 周嫱. 北京中医药大学, 2012(09)
  • [4]hNT-4基因修饰嗅鞘细胞结合组织工程技术治疗周围神经损伤的研究[D]. 李志辉. 内蒙古科技大学包头医学院, 2012(04)
  • [5]丝素蛋白纳米纤维直径对嗅鞘细胞生长和迁移影响的研究[D]. 吴鹏. 苏州大学, 2011(06)
  • [6]OECs修复SCI的研究进展[J]. 李军,魏开斌. 泰山医学院学报, 2010(10)
  • [7]嗅鞘细胞移植治疗脊髓损伤的研究进展[J]. 胡志俊,马迎辉. 中国骨伤, 2009(01)
  • [8]电针对急性脊髓损伤大鼠48h一氧化氮及钙离子作用的机理研究[D]. 程凯力. 北京中医药大学, 2008(12)
  • [9]电生理检测在同种异体神经移植处植入bFGF复合降解膜研究中的应用[J]. 代丽丽,任铭奎,吴锦生. 实用手外科杂志, 2007(02)
  • [10]碱性成纤维细胞生长因子复合缓释降解膜对同种异体移植神经的影响:电生理评价[J]. 任铭奎,代丽丽. 中国组织工程研究与临床康复, 2007(18)

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bFGF对晚期周围神经再生的电生理评价
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