一、抗冻保护剂的不同浓度对黑熊精液冷冻保存效果的研究（论文文献综述）
张柳明[1]（2021）在《牛磺酸对湖羊精液常温保存效果的研究》文中认为湖羊是世界着名的多胎绵羊品种,具有四季发情、一年两胎和生长发育快等优点。随着湖羊人工授精（AI）技术的大规模推广应用,养殖企业和养殖户对湖羊精液的需求量也越来越大。然而,目前湖羊精液存在常温保存时间短、精子活力低、受胎率不高等问题,严重影响了我国湖羊养殖规模的进一步扩大。因此,高效稳定的湖羊精液稀释液配方和保存温度十分关键,并且抗氧化剂的添加成为湖羊精液保存的有效研究导向。本试验选取牛磺酸（Tau）,探讨其在湖羊精液常温保存过程中的作用效果。首先从五种常温保存稀释液中筛选出最佳保存效果的配方,其次筛选出湖羊精液常温保存的最适温度,最后向此配方中分别添加10、20、40、80、100 mM的Tau,通过检测精子活力等运动参数、质膜完整率等功能完整性参数、丙二醛（MDA）含量等氧化应激参数、线粒体膜电位和受胎率等指标,分析其对湖羊精液常温保存效果的影响。本研究获得的主要结果如下:1.在5种常温保存稀释液中,稀释液A保存效果最佳,其主要成分是由15.35 g的Tris、8.20 g的柠檬酸、10.00 g的果糖、0.16 g的青霉素和0.35 g的链霉素硫酸盐溶于500.00 mL灭菌的超纯水构成。稀释液A在保存1～6 d内的精子活率、活力、顶体完整率、直线速率（VSL）、曲线速率（VCL）、路径速率（VAP）、侧摆幅度（ALH）和移动角度（MAD）最高且下降缓慢。稀释液A保存精子的有效存活时间达到3.08 d,显着高于其它四种稀释液（P≤0.05）。相比于其它稀释液,稀释液A在保存2～6d内的顶体完整率显着高于其它稀释液（P≤0.05）;相比于其它稀释液,稀释液A在保存1～4 d内的质膜完整率最高。因此,该配方对湖羊精液常温保存的效果较好,将稀释液A作为后续研究的基础稀释液。2.采用稀释液A,将稀释后的精液分别保存在15℃、20℃和25℃。保存2 d内,25℃下保存的精子活力最高;保存3～5 d内,20℃下保存的精子活力最高;保存6～9d内,15℃下保存的精子活力显着高于其它各组（P≤0.05）。15℃下保存的精子有效存活时间和总存活时间分别可达5.67 d、18.73 d,显着高于其它各组（P≤0.05）。保存1 d时,15℃下保存的精子质膜完整率显着高于其它各组（P≤0.05）;保存3～5 d内,15℃和20℃下保存的精子质膜完整率和顶体完整率显着高于25℃下保存的精子质膜完整率和顶体完整率（P≤0.05）;保存7 d时,15℃下保存的精子质膜完整率显着高于其它各组（P≤0.05）。保存5 d时,15℃下保存的精子活性氧（ROS）水平显着低于25℃组（P≤0.05）,超氧化物歧化酶（SOD）活力显着高于其它各组（P≤0.05）。因此,15℃为湖羊精液常温保存的最适温度,将15℃作为后续研究的精液保存温度。3.以稀释液A为基础稀释液,分别添加10、20、40、80和100 mM的Tau,结果表明,随着Tau浓度的提高,各处理组的精子活率、活力、质膜完整率、顶体完整率、总抗氧化能力（T-AOC）、SOD活力、过氧化氢酶（CAT）活力和线粒体膜电位呈现先升高后降低的趋势,精液中的MDA含量变化则呈相反趋势,精子中ROS含量呈逐渐下降的趋势。当Tau浓度为20 mM时,可显着提高精子质膜完整率、顶体完整率、SOD活力、CAT活力、T-AOC、线粒体膜电位和活率、活力、VSL等运动性能（P≤0.05）,还可以降低保存第5 d时精子的ROS的含量和精液中的MDA含量（P≤0.05）。采用常温保存2 d的20 mM Tau的精液进行AI,利用B超妊娠检测得到的受胎率为75.00%。因此,20 mM Tau为湖羊精液常温保存的最适添加浓度。
范文华[2]（2020）在《大豆卵磷脂和原花青素在山羊精液冷冻中的应用研究》文中进行了进一步梳理随着现代畜牧业发展,冷冻精液在人工受精中的需求日渐增大,且对冻精质量要求越来越高。卵黄（egg yolk,EY）作为精液冷冻保存中常用非渗透性冷冻保护剂,其成分复杂、易受病原微生物污染,不易制备标准浓度的冷冻保护剂。为探究成分稳定无污染的冷冻稀释液,本研究使用不同浓度大豆卵磷脂（soybean lecithin,SL）替代鸡蛋卵黄对山羊精液进行超低温冷冻保存。首先,研究筛选出了最佳的大豆卵磷脂添加浓度,其次,探讨了大豆卵磷脂和卵黄的协同保护作用,最后,在大豆卵磷脂稀释液中添加不同浓度原花青素（procyanidins,PC）,探明其对山羊冻精的抗氧化保护作用。本研究为大豆卵磷脂在山羊精液冷冻保存中的应用提供了实验依据。具体研究结果如下:1. 为研究大豆卵磷脂在山羊精液冷冻保存过程中的卵黄替代作用。本试验以20%鸡蛋卵黄（V/V）为对照,在山羊冻精基础稀释液中分别添加0.5%、1%、2%、3%大豆卵磷脂（m/V）,冷冻-解冻后经精子质量和抗氧化性指标检测。结果表明,精液解冻后,与20%卵黄对照组相比,2%大豆卵磷脂组精子活力、活率、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性无显着性差异（P>0.05）,但比较0.5%、1%和3%大豆卵磷脂组显着提高（P<0.05）。添加2%大豆卵磷脂组解冻后精子ROS和MDA含量最低,SOD活性最高,与20%卵黄对照组相比无显着性差异（P>0.05）,较0.5%、1%和3%大豆卵磷脂组精子抗氧化能力显着提高（P<0.05）。腹腔镜人工输精后,卵黄组和大豆卵磷脂组分别获得了81.82%和78.75%的45d B超检测妊娠率,72.73%和78.75%的妊娠产仔率,二者亦差异不显着（P>0.05）。稀释液中添加2%大豆卵磷脂能够替代卵黄作为山羊精液冷冻保护剂,从而避免卵黄作为动物源冷冻保护剂在冷冻过程中交叉传染疫病的风险。2. 在山羊冻精基础稀释液中分别添加10%EY+2%SL、20%EY+1%SL、20%EY+2%SL,对照组分别添加20%EY和2%SL,对比研究冻融后精子质量指标和抗氧化指标。结果表明:当冷冻稀释液中联合添加10%EY+2%SL,解冻后精子活力、活率、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性与20%EY和2%SL对照组相比无显着性差异,相较20%EY+1%SL和20%EY+2%SL联合添加组显着提高（P<0.05）;与20%EY和2%SL组相比,联合添加10%EY+2%SL组精子解冻后ROS和MDA含量以及SOD活性无显着性差异,但较另外两个联合添加组精子抗氧化能力显着提高（P<0.05）。山羊精液冷冻过程中,SL可替代或者部分替代EY进行添加,EY和SL的联合添加对山羊冻精无协同作用,20%EY中联合添加不同浓度的SL则会加大对冷冻精子的氧化损伤。3. 在以2%大豆卵磷脂稀释液的基础上,分别在冷冻保护剂中添加最终浓度为0μg·m L-1、10μg·m L-1、20μg·m L-1、40μg·m L-1、60μg·m L-1的原花青素,冷冻-解冻后分别对精子物理性、抗氧化和凋亡指标进行检测。结果表明,在大豆卵磷脂稀释液中添加PC浓度为40μg·m L-1（SL3组）时,解冻后精子活力、活率、顶体完整率、线粒体活性和质膜完整率最高,分别达58.49%、53.45%、55.37%、55.16%和50.46%,显着高于EY组和SL0组（P<0.05）。SL3组解冻后精子的SOD值(224.87U·m L-1)和GSH-PX含量(129.6 U·L-1)最高,总Caspase凋亡率（54.33%）和TUNEL凋亡率（41.36%）最低,与EY组和SL0组差异显着（P<0.05）。当PC的添加浓度提高至60μg·m L-1（SL4组）时,解冻后精子质量显着下降,表现为对精子毒性作用。添加PC浓度为40μg·m L-1可降低精子氧化损伤和细胞凋亡,提高冻精品质。综上,在山羊精液冷冻基础稀释液中添加2%大豆卵磷脂可有效替代20%卵黄作为液氮超低温冷冻保护剂,EY和SL的联合添加对山羊冻精无协同作用,且在2%大豆卵磷脂稀释液中添加外源抗氧化剂PC,可有效提高精子抗氧化能力。
刘定帮[3]（2020）在《花旗松素、山奈酚和根皮素对猪精子保存效果的影响》文中研究指明在世界范围内,人工受精技术极其广泛的用于养猪生产中,猪精液保存技术作为人工授精过程中重要的一步越来越受到重视。猪精液在保存过程中易受到各种不利的影响而产生过量的ROS,对精子结构造成损害,极大影响保存后精子的质量。因此需要在精液保存稀释剂中添加天然高效且无毒的抗氧化剂,以保护精子少受ROS的损害,提高保存后精子的质。本试验添加不同浓度的花旗松素、山奈酚和根皮素在猪精子保存稀释液中,然后分别检测猪精子的活力与活率、顶体与质膜的完整性、线粒体活性、超氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活性,脂质氧化试剂盒检测MDA水平。最后选取冷冻保存后精子品质最好的浓度组进行体外受精试验。实验结果如下:1.猪精子保存稀释液中添加一定浓度的花旗松素后明显提升猪精子保存效果。常温保存过程中精子的活率、质膜与顶体完整性获得显着提高（P<0.05）。当稀释液中花旗松浓度为1.6m M时,对猪精子品质的提升效果最好。低温保存稀释液中添加一定浓度的花旗松素,可将精液的保存时间延长到9d,第9d时,精子的活率以及质膜与顶体完整性得到显着提高（P<0.05）。当稀释液中花旗松浓度为1.6m M时,保存过程中猪精子品质最好。1.2m M的花旗松素添加到猪精子冷冻保存稀释液的中,解冻过后猪精子的线粒体活性、质膜与顶体完整率以及活力与活率得到明显提高,显着降低MDA含量并提高SOD酶和GSH-Px酶的活性（P<0.05）,对CAT酶的活性没有明显提升。2.猪精子保存稀释液中添加一定浓度的山奈酚后明显提升猪精子保存效果。常温保存过程中猪精子的活率及质膜与顶体完整率明显提高（P<0.05）。山奈酚浓度为100μM时,对猪精子品质的提升效果最好。添加一定浓度的山奈酚对低温保存过程中的猪精子有较好的保护作用,可将精液的保存时间延长到9d,第9d时,精子的活率及质膜与顶体完整性明显提高（P<0.05）。当稀释液中花旗松浓度为100μM时,保存过程中猪精子的质量最好。添加80μM的山奈酚到猪精子冷冻保存稀释液的中,解冻后精子的线粒体活性、活力与活率、质膜与顶体完整率明显提高,显着降低MDA含量并提高SOD酶、CAT酶和GSH-Px酶的活性（P<0.05）。3.猪精子保存稀释液中添加一定浓度的山奈酚后明显提升猪精子保存效果。常温保存过程中精子的活率及质膜与顶体完整性明显提高（P<0.05）。当稀释液中根皮素浓度为80μM时,对猪精子品质的提升效果最好。添加一定浓度的根皮素后在猪精子低温保存稀释液中后,可将精液的保存时间延长到9d,第9d时,猪精子的活率、质膜完整性和顶体完整性（P<0.05）明显提高。当稀释液中根皮素度为80μM时,猪精子的保存效果最好。添加60μM的根皮素到猪精子冷冻保存稀释液的中后,解冻后精子的线粒体活性、活力与活率、质膜与顶体完整率明显提高,显着降低MDA含量并提高SOD酶、CAT酶和GSH-Px酶的活性（P<0.05）。4.在猪精子冷冻保存稀释液中,分别添加一定浓度的花旗松素、山奈酚和根皮素可以显着提高解冻后猪精子体外受精过程中的穿透率、单精入卵率和总受精率（P<0.05）,稀释液中最适浓度分别为花旗松素1.6m M、山奈酚100μM、根皮素80μM。
刘光霞,吴兴兵,何勇凤,邓智明,杨德国,王小明,杨少荣,刘欢[4]（2020）在《圆口铜鱼精子超低温冷冻保存》文中研究说明为建立圆口铜鱼（Coreius guichenoti）精子超低温冷冻保存方法,采用计算机辅助精子分析系统（CASA）评价了4种稀释液（D15、D20、L1、D1）, 3种抗冻保护剂[二甲基甲酰胺（DMF）、二甲基亚砜（DMSO）、甲醇（METH）]在3种体积浓度（7.5%、10%、12.5%, V/V）下对圆口铜鱼精液的冷冻保存效果,并比较了150 mOsm/kg NaCl与超纯水作为激活剂对精子活力的影响。结果表明,D1组稀释液的精子活率（MOT）最高,为（74.64±13.17）%,与鲜精无显着差异（P>0.05）;以10%甲醇作为抗冻保护剂的圆口铜鱼精子经超纯水激活后,测得MOT最高,达到（78.11±14.74）%,与鲜精无显着差异（P>0.05）,精子运动速度达最大,平均曲线运动速度（VCL）、平均直线运动速度（VSL）、VAP（平均路径运动速度）分别达到（50.28±12.46）μm/s、（35.06±10.82）μm/s、（39.44±12.46）μm/s,精子快速运动时间和寿命分别为（8.67±1.15） s、（33.33±5.00） s,显着低于鲜精（P<0.05）; 7.5%甲醇组和7.5%二甲基甲酰胺组的MOT次之,分别为（77.71±17.74）%、（76.42±12.49）%,抗冻剂二甲基亚砜组的MOT显着低于甲醇组、二甲基甲酰胺组（P<0.05）。12.5%的3种抗冻保护剂中,几乎无精子存活;在不同种类不同浓度的抗冻剂保护下,10%甲醇组,相较于使用超纯水激活,用150 mOsm/kg NaCl激活后的精子活率和寿命更高,说明Na+有延长冻精寿命,提高精子活率的作用。研究表明, D1+10%METH （7.8 g/L NaCl+0.5 g/L KCl+15 g/L葡萄糖+10%METH）可用于圆口铜鱼精液超低温冷冻保存,为圆口铜鱼的繁育工作和种质资源保护奠定了基础。
吴梦,刘雪芹,刘子嘉,肖普英,丁玉春,刘作华,葛良鹏[5]（2019）在《猪精液超低温冷冻保存研究进展》文中进行了进一步梳理猪人工授精（AI）技术已经广泛应用于畜牧业生产,但精液来源基本是17℃保存的新鲜猪精液,不利于精液长期保存和猪种资源保存。超低温冷冻保存技术是猪精液长期保存最有效的方法,冷冻精液可以实现不同地区、不同国家优良种猪精液间的交流,从而大大提高猪种资源的利用率,但冷冻解冻后的精液质量较差,受胎率、窝产仔数远低于鲜精,极大地限制了猪精液冷冻保存技术的广泛应用。本文综述了猪精液冷冻保存研究概况、猪精液冷冻损伤机理和猪精液冷冻保存影响因素,以期为猪精液超低温冷冻保存研究提供新的思路和方法。
刘光霞[6]（2019）在《圆口铜鱼精子冷冻保存技术研究》文中指出圆口铜鱼（Coreius guichenoti）,隶属于鲤形目（Cytcriniformes）、鲤科（Cyprinidae）、鮈亚科（Gotiongiae）、铜鱼属（Coreius）,是一种习惯在水流湍急的江河中栖息的河道洄游鱼类,常在岩礁众多的深潭中成群出现,曾是我国长江上游江段的主要优势物种和重要经济鱼类。然而,近年来,由于水电工程设施建设,长江流域生态环境改变、人类无节制的捕捞对圆口铜鱼的繁殖、生长造成了破坏性的影响,种群数量逐年下降,渔获物中幼龄或低龄鱼所占比重较大。是为长江上游珍稀特有鱼类保护区指标性物种之一,其保护问题亟待解决。开展增殖放流工作对保护珍稀鱼类至关重要,实现亲鱼的人工驯养、规模化化繁育则是增值放流的充分条件。目前,圆口铜鱼人工驯养繁殖圆满成功,已攻克该物种保护的关键技术难题,但亲鱼难捕获、养殖亲鱼数量少,雌雄配子发育不同步,雄鱼精液量少等问题制约了圆口铜鱼的规模化繁育。本研究通过对圆口铜鱼精液渗透压、不同渗透压下精子活力、精子4℃低温保存稀释液及不同抗冻剂下圆口铜鱼精液超低温冷冻保存效果的研究,旨在探索影响精子活力的因素和适宜圆口铜鱼精子保存的方法,以期为圆口铜鱼人工繁育、精子超低温冷冻保存提供基础数据。研究内容及主要研究结果如下:1.不同渗透压对圆口铜鱼精子活力的影响为探讨圆口铜鱼精子活力与渗透压的关系,研究了圆口铜鱼精液渗透压及其精子在2种溶液（NaCl和KCl）7个渗透压梯度（0、50、100、150、200、250、300 mOsm/kg）中的活动情况。结果表明:圆口铜鱼精液渗透压平均为252.48±4.20mOsm/kg;在0150 mOsm/kg梯度内,受渗透压影响,圆口铜鱼精子快速运动时间和寿命逐渐增加,在150 mOsm/kg NaCl、KCl溶液中,圆口铜鱼精子的快速运动时间分别为35.2 s、30.8 s,寿命分别为103.13 s、105.13 s;在150300mOsm/kg渗透压梯度内,圆口铜鱼精子快速运动时间和寿命均在不断下降,近似为0。研究结果可为圆口铜鱼精液保存提供参考依据。2.圆口铜鱼精子4℃低温保存分别在Kurokura1、D15、L1、L2、L3、L4六种稀释液中低温保存圆口铜鱼精子,结果表明:精子活率、寿命和运动速度均随保存时间的延长呈下降趋势。未经任何处理的鲜精在保存72 h后,几乎无精子存活。D15稀释液保存圆口铜鱼精子的效果最好,72 h,精子活率为（91.65±6.77）%,快速运动时间和寿命分别为10.00±1.67 s、41.33±7.42 s,观察至120 h,精子活率仍可达（75.28±42.56）%。四种溶液中,精子的VCL、VSL、VAP随时间的延长呈下降趋势。144 h,D15稀释液中精子的VCL、VSL、VAP分别为46.44μm/s、24.55μm/s和32.15μm/s,Kurokura1稀释液中精子已死亡。3.圆口铜鱼精液超低温冷冻技术与效果分析了四种稀释液（D15、D20、L1、D1）,三种抗冻保护剂（DMF[二甲基甲酰胺]、DMSO[二甲基亚砜]、METH[甲醇]）在三种浓度（7.5%、10%、12.5%,v/v）下对圆口铜鱼精液的冷冻保存效果。结果表明,D1组稀释液的MOT（精子活率）最高,为（74.64±13.17）%,与鲜精无显着差异;抗冻剂终浓度为10%METH组的圆口铜鱼精子,经无离子水激活后,测得MOT最高,达到（78.11±14.74）%,与鲜精差异不显着（P>0.05）,精子运动速度达最大,VCL（平均曲线运动速度）、VSL（平均直线速度）、VAP（平均路径速度）分别达到50.28±12.46μm/s、35.06±10.82μm/s、39.44±12.46μm/s,与鲜精有显着差异（P<0.05）,抗冻剂DMSO组的精子活率显着低于METH、DMF组;在不同种类不同浓度的抗冻剂保护下,发现10%METH组,相较于使用无离子水激活,用150mOsm/kg NaCl激活后的精子活率和寿命更高,Na+有延长冻精寿命,提高精子活率的作用。研究表明,D1+10%METH可用于圆口铜鱼精液超低温冷冻保存,为圆口铜鱼的繁育工作和种质资源保护奠定基础。
吴大平[7]（2017）在《不同抗氧化剂对地中海水牛精液冷冻保存效果的影响研究》文中进行了进一步梳理意大利地中海水牛因其高产奶量和优良的奶质被公认为是目前世界上河流型水牛中乳用性能最好的品种之一。广西于2014年引进该品种水牛,受冷冻保存配方、冷冻程序和个体差异等因素影响,目前的种公牛精液冷冻保存效果不甚理想,这极大地影响了地中海水牛的繁殖效率。因此,探讨抗氧化剂等对精液冷冻保存效果的影响,研发针对意大利地中海水牛的精液稀释液配方,对提高种公牛利用率有着重大意义。为此,本研究在传统精液稀释液基础上,首先重新比较有效成分、调整其比例、同时引入新的保护剂、拟出新配方,随后应用改进的配方探讨添加褪黑素、谷胱甘肽和维生素E等不同抗氧化剂对地中海水牛精液冷冻保存的效果影响。研究结果如下。1.地中海水牛精液冷冻稀释液配方的改进研究在水牛精液常用冷冻稀释液的基础上,首先对配方中的能量物质、抗冻物质和抗菌物质分别进行效果比较。结果发现,稀释液成分中卵黄的冷冻保存效果优于鲜全奶;3%甘油和2%乙二醇联合作用效果优于5%的甘油、5%的乙二醇和5%的DMSO三者单独作用时的效果;青霉素和庆大霉素的抑菌效果比较明显;其次,对于新引入的保护剂牛血清白蛋白（BSA）,和未添加组相比,0.9 mg/mL的BSA显着提高了水牛精子的活率,降低其畸形率（P<0.05）;改进后的地中海水牛精液稀释液配方为:0.10 g/mL葡萄糖、0.0006 g/mL柠檬酸钠、0.0011 g/mL青霉素、0.0006 g/mL庆大霉素、0.9 mg/mLBSA、3%甘油、2%乙二醇、20%卵黄、75%蒸馏水。2.褪黑素、谷胱甘肽和维生素E对地中海水牛精液冷冻保存效果的影响在冷冻稀释液中添加褪黑素（MLT）时发现,添加0.Img/mLMLT显着提高了受精卵分裂率和GSH-Px酶活性（P<0.05）,对精子活率、畸形率、运动性能等变化无显着差异（P>0.05）;添加0.2mg/mL、0.4mg/mL MLT明显提高了冻后精子活率、顶体完整率、GSH-Px酶活性、受精卵分裂率和囊胚率（P<0.05）,添加0.2mg/mLMLT还显着降低了精子畸形率（P<0.05）。添加0.8mg/mLMLT明显降低了精子活率（P<0.05）,对精子运动性能、受精卵分裂率、囊胚率等均没有显着影响（P>0.05）。添加谷胱甘肽（GSH）处理时发现,添加0.1mMGSH显着提高精子前向性和质膜完整率,降低了精子畸形率（P<0.05）,对精子活率和顶体完整率无明显影响（P>0.05）。添加0.2 mMGSH明显了提高精子活率、运动性能、质膜完整率、GSH-Px酶活性和囊胚率（P<0.05）,显着降低精子畸形率和MDA水平（P<0.05）。0.4mMGSH增加了精子畸形率,显着提高GSH-Px酶活性、受精率分裂率、囊胚孵化率（P<0.05）,对顶体完整率、SOD酶活性等无明显影响（P>0.05）。添加0.8 mMGSH增加了精子畸形率（P<0.05）,对精子抗氧化物酶活性和囊胚率等无显着性影响（P>0.05）。添加维生素E（VE）处理时发现,与未添加组相比,0.1 mg/mL和0.2 mg/mLVE对精子活率无明显影响（P>0.05）。0.2mg/mL、0.4mg/mLVE明显提高精子的GSH-Px酶活性、顶体完整率、质膜完整率、受精卵分裂率、囊胚率和囊胚孵化率,显着降低了精子MDA水平（P<0.05）。0.4mg/mL、0.8mg/mLVE显着提高了精子活率（P<0.05）,其中0.4mg/mL时精子活率最大,0.4mg/mL VE显着降低了精子畸形率,0.8mg/mLVE导致畸形率增加（P<0.05）,0.8mg/mLVE明显提高受精卵分裂率（P<0.05）,对囊胚率和囊胚孵化率无显着影响（P>0.05）。3.三种抗氧化剂配伍作用对地中海水牛精液冷冻保存效果的影响为了解两种或多种抗氧化剂配伍添加的协同效果,根据单独添加MLT、GSH和VE时的作用效果确定各抗氧化剂的配伍浓度,分别为MLT（0.2 mg/mL、0.4 mg/mL）、GSH（0.1 mM、0.2 mM）、VE（0.2 mg/mL、0.4 mg/mL）,将其两两组合,共形成12个配伍组合。结果发现,与未添加组相比,0.2 mg/mL VE+O.1 mM GSH、0.4 mg/mL VE+0.2 mg/mL MLT、0.2 mg/mL MLT+0.1 mM GSH组合均能在一定程度上提高了精子活率,降低精子畸形率,其中 0.2 mg/mL MLT+0.1 mM GSH 和 0.4 mg/mL VE+0.2 mg/mL MLT 表现较突出。三个配伍组合均显着提高了精子运动性能、顶体完整率和质膜完整率（P<0.05）,其中尤以0.2mg/mLMLT+0.ImMGSH组合提升效果最好。三个配伍组合均显着提高了受精卵分裂率（P<0.05）,0.4 mg/mL VE+0.2 mg/mL MLT和 0.2 mg/mL MLT+0.1 mM GSH组合对囊胚率的提高有显着差异（P<0.05）,0.4 mg/mL VE+0.2 mg/mL MLT和0.2 mg/mL VE+0.1 mM GSH显着提高了囊胚孵化率（P<0.05）。综合考虑,0.2 mg/mL MLT+0.1 mM GSH 和 0.4 mg/mL VE+0.2 mg/mL MLT 组合优于 0.2 mg/mL VE+0.1 mM GSH。以上结果表明,添加 0.2 mg/mL MLT、0.2 mM GSH 或 0.04 mg/mL VE可提高水牛精液的冷冻保存效果较好,采用0.4mg/mLVE+0.2mg/mL MLT或0.2 mg/mL MLT+0.1 mM GSH的组合添加剂对地中海水牛精液冷冻保存可取得较好效果。
王艳华[8]（2016）在《四种抗氧化剂对山羊精液冷冻保存效果的影响》文中指出精液冷冻保存技术的发展解决了精液长期保存的问题,使采精和受精在时间和空间上产生了分离,延长了精子的体外储存时间,便于长途运输,促进了遗传资源跨地区、跨国界的交流和共享,加快了畜群品种改良步伐,缩短了品种改良周期。在冷冻过程中,精子会遭受不同程度的氧化损伤,导致精液品质下降,使得羊精液冷冻保存技术还没有得到大范围的推广。大量研究证明,在精液冷冻稀释液中补充抗氧化剂能够提高冻融后的精液品质。本试验以番茄红素、α-硫辛酸、海带多糖和枸杞多糖等作为抗氧化剂初步探究添加不同浓度的抗氧化剂对山羊精液的冷冻保护作用。本研究获得的主要结果如下:1.在山羊精液冷冻基础液中分别添加番茄红素和α-硫辛酸能够有效提高冻融后精子活率、顶体完整率、质膜完整率和线粒体活性等。与其他处理组相比,基础液中添加1.0 mg/mL的番茄红素和10μg/mL的α-硫辛酸效果最好,显着提高了精子活率（52.04%和50.71%）、顶体完整率（51.33%和50.23%）、质膜完整率（53.57%和49.12%）和线粒体活性（49.31%和47.46%）（P<0.05）。0.5 mg/mL的番茄红素组和2.0 mg/mL的番茄红素组以及5μg/mL的α-硫辛酸组和15μg/mL的α-硫辛酸组对山羊冻精的保存效果次之,4.0 mg/mL的番茄红素组和2.0μg/mL的α-硫辛酸组与对照组差异不显着（P>0.05）。2.在山羊精液冷冻基础液中联合添加番茄红素和α-硫辛酸能够有效改善冻融后精子活率、顶体完整率、质膜完整率和线粒体活性,与单独添加番茄红素组和α-硫辛酸组相比,1.0 mg/mL番茄红素和5μg/mL的α-硫辛酸组合组冷冻保存效果最好,精子活率、顶体完整率、质膜完整率和线粒体活性分别达到53.30%、53.77%、53.99%和50.94%（P<0.05）;0.5 mg/mL的番茄红素和5μg/mL的α-硫辛酸组合组与1.0 mg/mL番茄红素和5μg/mL的α-硫辛酸组合组无显着差异（P>0.05）;0.5 mg/mL的番茄红素和5μg/mL的α-硫辛酸组合组及1.0 mg/mL的番茄红素和10μg/mL的α-硫辛酸组合组则与单独添加组无显着差异（P>0.05）。3.在山羊精液冷冻基础液中分别添加海带多糖和枸杞多糖能够有效提高冻融后精子活率、顶体完整率、质膜完整率和线粒体活性等指标。与其他处理组相比,基础液中添加1.0 mg/mL的海带多糖和4.0 mg/mL的枸杞多糖效果最好,显着提高了精子活率（47.79%和49.56%）、顶体完整率（49.68%和49.87%）、质膜完整率（50.59%和48.07%）和线粒体活性（48.72%和49.32%）（P<0.05）,但是高浓度的海带多糖（4.0 mg/mL）和枸杞多糖（8.0 mg/mL）对山羊冻精的保护效果与对照组无显着差异（P>0.05）。4.在山羊精液冷冻基础液中联合添加海带多糖和枸杞多糖能够有效改善冷冻解冻后山羊精子活率、顶体完整率、质膜完整率和线粒体活性,其中1.0 mg/mL海带多糖和2.0 mg/mL枸杞多糖组合组效果显着优于单独添加组（P<0.05）,精子活率、顶体完整率、质膜完整率和线粒体活性分别达到51.01%、52.76%、54.35%和51.39%;但是联合添加海带多糖和枸杞多糖对冻融后精子线粒体活性不会产生影响,高浓度组合组（1.0mg/mL海带多糖和4.0 mg/mL枸杞多糖）与单独添加组差异不显着（P>0.05）。5.在山羊精液冷冻基础液中单独添加番茄红素和α-硫辛酸以及海带多糖和枸杞多糖均能有效提高SOD、CAT、GSH-Px三种抗氧化酶的活性,与对照组相比,1.0 mg/mL的番茄红素、10μg/mL的α-硫辛酸、1.0 mg/mL的海带多糖和4.0 mg/mL的枸杞多糖效果最好（P<0.05）;联合添加组也能有效提高SOD、CAT、GSH-Px三种抗氧化酶的活性,其中1.0 mg/mL番茄红素和5μg/mL的α-硫辛酸组合组以及1.0 mg/mL海带多糖和2.0 mg/mL枸杞多糖组合组对山羊精子的冷冻保护效果显着优于单独添加组（P<0.05）。
韩龙江[9]（2015）在《几种海洋经济动物种质资源超低温冷冻保存研究》文中指出种质资源是海水养殖生产、优良品种培育及海洋渔业可持续发展的重要物质基础。然而,随着海水养殖业的快速发展,海洋动物核心种质鉴定和保护研究严重滞后的负面效应日益突出。超低温保存技术是种质细胞长期保存的重要方法,相关理论与技术的发展,对于种质资源的保护、遗传改良以及养殖业的可持续发展有着重要应用价值和理论意义。1.太平洋鳕精液超低温冷冻采用分步降温法冷冻保存太平洋鳕（Gadus macrocephalus）精液,并用扫描电镜和透射电镜技术研究了精子的超微结构损伤。分析了添加剂（蛋黄）及五种抗冻剂（PG（丙二醇）、DMSO（二甲基亚砜）、EG（乙二醇）、GLY（甘油）、MeOH（甲醇））不同浓度（8%、10%、12%、14%、16%、18%）对太平洋鳕精子冷冻保存效果的影响。实验结果表明,蛋黄能够显着提高太平洋鳕冷冻保存效果（P<0.05）；在以HBSS为稀释液,12%PG中添加10%蛋黄保存的冻融精子运动率最高（85.87%±1.6%）,显着高于其他冻存组（P<0.05）。添加蛋黄的12%浓度的DMSO组解冻后精子运动速率较高,平均直线速度、平均曲线速度、平均路径速度分别达到了（120.39±20.78）μm/s、（120.39±20.78）μm/s、 （155.64±12.02）μm/s,与其他各实验组差异显着（P<0.05）。通过扫描电镜和透射电镜观察新鲜和冻融后的鳕鱼精子发现,鲜精中75.5%精子形态结构正常、24.5%精子形态结构异常；运动率最高的冻精中67%精子形态结构正常、33%精子形态结构异常。超低温保存对太平洋鳕精子结构产生了显着影响,细胞膜破裂、线粒体肿胀变形,鞭毛脱落、断裂。2.条纹锯鮨精液超低温冷冻保存研究为建立条纹锯鮨（Centropristis striata）精液超低温冷冻保存方法,实验采用计算机辅助精子分析系统（CASA）分析了六种抗冻保护剂（GLY[甘油]、DMSO[二甲基亚砜]、PG[丙二醇]、EG[乙二醇]、MeOH[甲醇]、DMA[二甲基乙酰胺]）在四种不同浓度下（5、]0、]5、20%,v/v）对条纹锯鮨精液冷冻保存的效果。结果显示：以HBSS为稀释液,采用程序降温仪分步降温冷冻保存条纹锯鮨精液,37℃水浴解冻后的精子中,15%PG作为抗冻保护剂的精子运动率最高,达到93.1±0.9%,与鲜精差异不显着（P>0.05）,15%PG作为抗冻保护剂的精子水浴解冻后精子的运动速度最高,平均直线速度、平均曲线速度、平均路径速度分别达到了（88,3±0.3）μm/s、（76.2±0.5）μm/s、 （86.7±0.7）μm/s,与鲜精差异不显着（P>0.05）。在不同种类及不同浓度抗冻保护剂保护下,15%PG作为抗冻保护剂的精子解冻后1mmin内运动率变化与鲜精差异不显着（P>0.05）。研究表明,15%PG为条纹锯鮨最佳抗冻保护剂,可用于条纹锯鮨精液的超低温冷冻保存。3.太平洋牡蛎精液的超低温保存研究本研究筛选了六种抗冻保护剂（GLY[甘油],DMSO[二甲基亚砜],PG[丙二醇],EG[乙二醇],DMA[二甲基乙酰胺],MeOH[甲醇]）及其五种不同浓度（6%,8%,10%,12%,14%,V/V）、三种稀释液（无钙HBSS,人工海水[ASW],过滤海水[FSW]）、四种稀释比例（1：1,1：2,1：4,1：6）、三种添加剂（蔗糖,葡萄糖,海藻糖）、三个分步降温程序（程序A,程序B,程序C）对太平洋牡蛎（Crassostrea gigas）精液冷冻保存的影响,成功建立了太平洋牡蛎精液超低温保存方法：以10%DMSO为抗冻保护剂,无钙HBSS为稀释液,1：4的稀释比例,添加0.45mol/L的海藻糖,采用分布降温法冷冻保存太平洋牡蛎的精液,37℃水浴解冻后精液运动率达到71.27%±3.24%,显着高于其它实验组（P<0.05）,受精率和孵化率分别达到95.04%±1.99%、93.33%±1.33%,与鲜精（88.89%±15.16%,94.90%±0.95%）、程序冷冻前精液（95.96%±2.15%,92.67%±14.83%）差异不显着（P>0.05）,证明该太平洋牡蛎精液超低温保存方法可以应用于生产实践和科学研究中。4.太平洋牡蛎精子超低温冷冻后超微结构损伤研究采用程序降温仪分步降温冷冻保存太平洋牡蛎精液,并用扫描电镜、透射电镜研究了精子的超微结构损伤。超低温冷冻保存后太平洋牡蛎精子的运动率、受精率及孵化率与鲜精无显着差异。鲜精中84.5%的精子形态结构正常,冻精中73%的精子形态结构正常。形态结构正常的精子表现为顶体、质膜、线粒体与鞭毛结构完整、染色质形状规则,顶体、线粒体及中心粒结构正常,鞭毛形态完整、微管结构清晰；形态结构异常的精子表现为顶体脱落、解体,精子头部质膜膨胀、破裂、染色质肿胀、破裂、解体,线粒体移位、脱落、膨胀,嵴退化或消失,鞭毛弯折、断裂,微管解聚。结果显示,以10% DMSO为抗冻保护剂,HBSS溶液为稀释液,1：4的稀释比例,添加海藻糖,采用分步降温法冷冻保存,对太平洋牡蛎精子具有较好的抗冻保护作用,合适的冻存方法可以有效的保护太平洋牡蛎精子冷冻过程中结构损伤。本研究将有助于太平洋牡蛎种质资源的收集保存及应用。5.太平洋牡蛎担轮幼虫的超低温保存研究本实验研究了六种抗冻保护剂GLY（甘油）、DMSO（二甲基亚砜）、PG（丙二醇）、EG（乙二醇）、DMA（二甲基乙酰胺）和MET（甲醇）在三种不同浓度下（5%、10%、15%,v/v）对太平洋牡蛎担轮幼虫的毒性作用及冷冻保存的影响。太平洋牡蛎担轮幼虫毒性实验证明：抗冻保护剂的种类和浓度对太平洋牡蛎担轮幼虫产生的毒性强弱不同,在抗冻保护剂浓度为5%时,GLY、DMSO、 PG、EG对太平洋牡蛎的毒性作用显着低于其他抗冻保护剂（P<0.05）；随着抗冻保护剂浓度增加到10%,GLY、DMSO、EG、MET对太平洋牡蛎担轮幼虫的毒性作用显着低于其他抗冻保护剂（P<0.05）；而抗冻保护剂浓度为15%时,GLY、DMSO对太平洋牡蛎担轮幼虫的毒性作用显着低于其他抗冻保护剂（P<0.05）,且随着抗冻保护剂浓度的升高,其对太平洋牡蛎担轮幼虫的毒性作用也增大。太平洋牡蛎担轮幼虫的超低温冷冻保存实验证明：以10% DMSO作为抗冻保护剂,采用分步降温法冷冻保存太平洋牡蛎担轮幼虫,28℃水浴解冻后担轮幼虫运动率达到（73.00±2.00）%,显着高于其他实验组（P<0.05）,其次为GLY组,且各浓度间差异不显着（P>0.05）。该研究为太平洋牡蛎及其他贝类胚胎保存提供了科学依据,在贝类遗传育种和生物技术等方面具有一定的应用前景,具有重要的生产实践价值。
韩龙江,刘清华,纪利芹,温海深,黄雯,张国范,李军[10]（2014）在《太平洋牡蛎（Crassostrea gigas）担轮幼虫的超低温保存研究》文中研究表明本文研究了六种抗冻保护剂GLY（甘油）、DMSO（二甲基亚砜）、PG（丙二醇）、EG（乙二醇）、DMA（二甲基乙酰胺）和Me OH（甲醇）在三种不同浓度下（5%、10%、15%,v/v）对太平洋牡蛎（Crassostrea gigas）担轮幼虫的毒性作用及冷冻保存的影响。太平洋牡蛎担轮幼虫毒性实验证明:抗冻保护剂的种类和浓度对太平洋牡蛎担轮幼虫产生的毒性强弱不同,在抗冻保护剂浓度为5%时,GLY、DMSO、PG、EG对太平洋牡蛎的毒性作用显着低于其他抗冻保护剂（P<0.05）;随着抗冻保护剂浓度增加到10%,GLY、DMSO、EG、Me OH对太平洋牡蛎担轮幼虫的毒性作用显着低于其他抗冻保护剂（P<0.05）;而抗冻保护剂浓度为15%时,GLY、DMSO对太平洋牡蛎担轮幼虫的毒性作用显着低于其他抗冻保护剂（P<0.05）,且随着抗冻保护剂浓度的升高,其对太平洋牡蛎担轮幼虫的毒性作用也增大。太平洋牡蛎担轮幼虫的超低温冷冻保存实验证明:以10%DMSO作为抗冻保护剂,采用分布降温法冷冻保存太平洋牡蛎担轮幼虫,28°C水浴解冻后担轮幼虫运动率达到（73.00±2.00）%,显着高于其他实验组（P<0.05）,其次为GLY组,且各浓度间差异不显着（P>0.05）。该研究为太平洋牡蛎及其他贝类胚胎保存提供了科学依据,在贝类遗传育种和生物技术等方面具有一定的应用前景,具有重要的生产实践价值。
二、抗冻保护剂的不同浓度对黑熊精液冷冻保存效果的研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、抗冻保护剂的不同浓度对黑熊精液冷冻保存效果的研究（论文提纲范文）
（1）牛磺酸对湖羊精液常温保存效果的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略语表 |
| 第1章 绪论 |
| 1.1 湖羊的起源与特性 |
| 1.2 AI技术的研究 |
| 1.3 绵羊精液常温保存技术概况 |
| 1.3.1 绵羊精液常温保存的原理 |
| 1.3.2 绵羊精液常温保存的影响因素 |
| 1.3.3 绵羊精液常温保存稀释液的主要成分及作用 |
| 1.4 稀释液中抗氧化剂的研究 |
| 1.4.1 酶类抗氧化剂 |
| 1.4.2 非酶类抗氧化剂 |
| 1.4.3 Tau |
| 1.5 研究意义与目的 |
| 1.5.1 本研究的意义 |
| 1.5.2 本研究的目的 |
| 第2章 湖羊精液常温保存稀释液的研究 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 试验材料 |
| 2.1.2 试验方法 |
| 2.1.3 测定指标 |
| 2.1.4 统计分析 |
| 2.2 结果与分析 |
| 2.2.1 五种稀释液配方对湖羊精子活率的影响 |
| 2.2.2 五种稀释液配方对湖羊精子活力的影响 |
| 2.2.3 五种稀释液配方对湖羊精子运动参数的影响 |
| 2.2.4 五种稀释液配方对湖羊精子存活时间的影响 |
| 2.2.5 五种稀释液配方对湖羊精子质膜完整率的影响 |
| 2.2.6 五种稀释液配方对湖羊精子顶体完整率的影响 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 研究结论 |
| 第3章 湖羊精液常温保存效果的研究 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 试验材料 |
| 3.1.2 试验方法 |
| 3.1.3 测定指标 |
| 3.1.4 统计分析 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 不同温度对湖羊精子活率的影响 |
| 3.2.2 不同温度对湖羊精子活力的影响 |
| 3.2.3 不同温度对湖羊精子运动参数的影响 |
| 3.2.4 不同温度对湖羊精子存活时间的影响 |
| 3.2.5 不同温度对湖羊精子质膜完整率的影响 |
| 3.2.6 不同温度对湖羊精子顶体完整率的影响 |
| 3.2.7 不同温度对湖羊精子ROS含量的影响 |
| 3.2.8 不同温度对湖羊精液中MDA含量的影响 |
| 3.2.9 不同温度对湖羊精子SOD活力的影响 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 研究结论 |
| 第4章 Tau对湖羊精液常温保存的研究 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 试验材料 |
| 4.1.2 试验方法 |
| 4.1.3 测定指标 |
| 4.1.4 统计分析 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 Tau对湖羊精子活率的影响 |
| 4.2.2 Tau对湖羊精子活力的影响 |
| 4.2.3 Tau对湖羊精子运动参数的影响 |
| 4.2.4 Tau对湖羊精子质膜完整率的影响 |
| 4.2.5 Tau对湖羊精子顶体完整率的影响 |
| 4.2.6 Tau对湖羊精子ROS含量的影响 |
| 4.2.7 Tau对湖羊精液中MDA含量的影响 |
| 4.2.8 Tau对湖羊精子SOD活力的影响 |
| 4.2.9 Tau对湖羊精液中CAT活力的影响 |
| 4.2.10 Tau对湖羊精液T-AOC的影响 |
| 4.2.11 Tau对湖羊精子线粒体膜电位的影响 |
| 4.2.12 常温保存2d的精液对湖羊受胎率的影响 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 研究结论 |
| 全文结论 |
| 创新点 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 |
| 致谢 |
（2）大豆卵磷脂和原花青素在山羊精液冷冻中的应用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 引言 |
| 1.1 动物精液冷冻保存的意义 |
| 1.2 动物精液冷冻保存研究进展 |
| 1.2.1 国内外动物精液冷冻保存研究进展 |
| 1.2.2 国内外山羊精液冷冻保存研究进展 |
| 1.3 冷冻稀释液研究进展 |
| 1.3.1 动物源性稀释液 |
| 1.3.3 无动物源性稀释液 |
| 1.4 .精液质量评定 |
| 1.4.1 精子冷冻损伤原理和机制 |
| 1.4.2 精子质量检测指标 |
| 1.5 山羊抗氧化剂研究 |
| 1.5.1 原花青素 |
| 1.6 研究目的和意义 |
| 第二章 大豆卵磷脂替代卵黄稀释液对山羊冻精效果的影响 |
| 引言 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 试验动物 |
| 2.1.2 试剂和仪器 |
| 2.1.3 稀释液的配制 |
| 2.1.4 精液采集 |
| 2.1.5 精液冷冻和解冻 |
| 2.1.6 精液质量检测 |
| 2.1.7 羊同期发情处理 |
| 2.1.8 腹腔镜输精 |
| 2.2 统计分析 |
| 2.3 结果与分析 |
| 2.3.1 大豆卵磷脂添加对山羊冻精质量的影响 |
| 2.3.2 大豆卵磷脂添加对冻后精子线粒体活性的影响 |
| 2.3.3 大豆卵磷脂添加对山羊精子抗氧化能力的影响 |
| 2.3.4 腹腔镜输精比较 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 大豆卵磷脂与卵黄在山羊精液冷冻过程中的联合作用研究 |
| 引言 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 动物和试剂 |
| 3.1.2 稀释液的配制 |
| 3.1.3 精液采集 |
| 3.1.4 精液冷冻和解冻 |
| 3.1.5 精子质量检测 |
| 3.2 统计与分析 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 EY和SL及其联合添加对山羊冻精质量的影响 |
| 3.3.2 EY和SL及其联合添加对山羊冻精线粒体活性的影响 |
| 3.3.3 EY和SL及其联合添加对山羊冻精抗氧化能力的影响 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 大豆卵磷脂稀释液中添加原花青素对山羊精液冷冻效果的影响 |
| 引言 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 试剂与仪器 |
| 4.1.2 稀释液的配制 |
| 4.1.3 精液采集 |
| 4.1.4 精液冷冻和解冻 |
| 4.1.5 精子质量检测 |
| 4.2 统计分析 |
| 4.3 结果与分析 |
| 4.3.1 大豆卵磷脂稀释液中添加原花青素对冻后山羊精子质量的影响 |
| 4.3.2 大豆卵磷脂稀释液中添加原花青素对冻后山羊精子线粒体活性的影响 |
| 4.3.3 大豆卵磷脂稀释液中添加原花青素对山羊冻精抗氧化能力的影响 |
| 4.3.4 大豆卵磷脂稀释液中添加原花青素对山羊冻精凋亡的影响 |
| 4.4 讨论 |
| 4.5 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（3）花旗松素、山奈酚和根皮素对猪精子保存效果的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 文献综述 |
| 1.1 液态保存对猪精子的影响 |
| 1.1.1 猪精子液态保存的简介 |
| 1.1.2 液态保存的影响因素 |
| 1.2 固态保存对猪精子的影响 |
| 1.2.1 猪精液固态保存的简介 |
| 1.2.2 猪精液固态保存的损伤机理 |
| 1.2.3 固态保存对猪精子的影响 |
| 1.2.4 影响猪精子固态保存的因素 |
| 1.3 研究的目的意义 |
| 第二章 花旗松素对猪精子保存效果的研究 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 主要试剂药品 |
| 2.1.2 仪器设备 |
| 2.1.3 溶液配制方法 |
| 2.1.4 猪精液样品的采集 |
| 2.1.5 猪精子的保存方法 |
| 2.1.6 猪精子的解冻复苏 |
| 2.1.7 猪精子质量的评定 |
| 2.1.8 统计分析 |
| 2.2 试验设计 |
| 2.2.1 常温保存 |
| 2.2.2 低温保存 |
| 2.2.3 冷冻保存 |
| 2.3 试验结果 |
| 2.3.1 添加花旗松素对猪精子常温保存的影响 |
| 2.3.2 添加花旗松素对猪精子低温保存的影响 |
| 2.3.3 添加花旗松素对猪精子冷冻保存的影响 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 山奈酚对猪精子保存效果的研究 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 主要药品试剂 |
| 3.1.2 仪器设备 |
| 3.1.3 溶液配制方法 |
| 3.1.4 猪精液样品采集方法 |
| 3.1.5 猪精子保存方法 |
| 3.1.7 精子质量的检测 |
| 3.1.8 统计分析方法 |
| 3.2 试验设计 |
| 3.2.1 常温保存 |
| 3.2.2 低温保存 |
| 3.2.3 冷冻保存 |
| 3.3 试验结果 |
| 3.3.1 山奈酚对猪精子常温保存过程中的影响 |
| 3.3.2 添加山奈酚对猪精子低温保存的影响 |
| 3.3.3 添加山奈酚对猪精子冷冻保存试验结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 根皮素对猪精子保存效果的研究 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 主要试剂 |
| 4.1.2 仪器设备 |
| 4.1.3 溶液配制方法 |
| 4.1.4 猪精液样品的采集 |
| 4.1.5 猪精液的保存方法 |
| 4.1.6 猪精子的质量检测 |
| 4.1.7 统计分析 |
| 4.2 试验设计 |
| 4.2.1 常温保存 |
| 4.2.2 低温保存 |
| 4.2.3 冷冻保存 |
| 4.3 试验结果 |
| 4.3.1 添加根皮素对常温保存的影响 |
| 4.3.2 添加根皮素对低温保存的影响 |
| 4.3.3 添加根皮素对冷冻保存的影响 |
| 4..5小结 |
| 第五章 花旗松素、山奈酚和根皮素对冷冻保存猪精子体外受精能力的影响 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 主要试剂药品 |
| 5.1.2 设备仪器 |
| 5.1.3 溶液配制方法 |
| 5.1.4 猪精液样品的采集 |
| 5.1.5 猪精子的冷冻保存 |
| 5.1.6 猪卵母细胞的收集与培养 |
| 5.1.7 精子体外获能和受精 |
| 5.1.8 评价卵母细胞的受精率 |
| 5.1.9 统计分析 |
| 5.2 试验结果 |
| 5.2.1 花旗松素对猪精子体外受精的影响 |
| 5.2.2 山奈酚对猪精子体外受精的影响 |
| 5.2.3 根皮素对猪精子体外受精的影响 |
| 5.3 讨论 |
| 5.4 小结 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（4）圆口铜鱼精子超低温冷冻保存（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 样品采集 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 筛选稀释液 |
| 1.2.2 抗冻剂筛选 |
| 1.2.3 不同激活液中冻精质量检测 |
| 1.3 数据处理 |
| 2 结果与分析 |
| 2.1 不同稀释液对圆口铜鱼精子活力的影响 |
| 2.2 抗冻剂对精子快速运动、寿命和活率的影响 |
| 2.3 不同浓度不同种类的抗冻剂对精子运动速率的影响 |
| 2.4 激活液中Na+对冻精质量的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 稀释液对精子活力的影响 |
| 3.2 抗冻剂种类和浓度对精子活力的影响 |
| 3.3 激活液中Na+对冷冻精子质量的影响 |
（5）猪精液超低温冷冻保存研究进展（论文提纲范文）
| 1 猪精液冷冻保存的研究概况 |
| 2 猪精液冷冻损伤机理 |
| 2.1 物理性损伤 |
| 2.2 化学性损伤 |
| 2.3 氧化性损伤 |
| 3 猪精液冷冻保存的影响因素 |
| 3.1 精液稀释液 |
| 3.2 冷冻剂型 |
| 3.3 冷冻方法 |
| 4 展望 |
（6）圆口铜鱼精子冷冻保存技术研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 引言 |
| 1 圆口铜鱼研究概况 |
| 1.1 圆口铜鱼生物学概述 |
| 1.2 圆口铜鱼研究进展 |
| 2 鱼类精液保存研究进展 |
| 2.1 鱼类精子生理生态特征研究 |
| 2.2 鱼类精子质量的评价 |
| 2.3 鱼类精子活力的影响因素 |
| 2.3.1 渗透压 |
| 2.3.2 Na~+、K~+、Ca~(2+) |
| 2.3.3 温度 |
| 2.3.4 pH |
| 2.3.5 其他因素 |
| 3 鱼类精液的主要保存方法 |
| 3.1 常温保存 |
| 3.2 低温保存 |
| 3.3 超低温冷冻保存 |
| 4 圆口铜鱼精液保存研究 |
| 5 选题目的与意义 |
| 第二章 不同渗透压对圆口铜鱼精子活力的影响 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 实验鱼来源 |
| 2.1.2 精液采集 |
| 2.2 试验方法 |
| 2.2.1 精液渗透压的测定 |
| 2.2.2 试验溶液的配置 |
| 2.2.3 精子活力观察方法 |
| 2.3 数据分析与处理 |
| 3 结果和分析 |
| 3.1 圆口铜鱼精液渗透压 |
| 3.2 不同溶液对圆口铜鱼精子快速运动的影响 |
| 3.3 不同溶液对圆口铜鱼精子寿命的影响 |
| 4 讨论 |
| 4.1 渗透压对精子活力的影响 |
| 4.2 NaCl、KCl溶液对精子活力的影响 |
| 第三章 圆口铜鱼精液低温保存研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 实验鱼来源 |
| 2.2 精液采集 |
| 2.3 稀释液配制 |
| 2.4 精子活力检测方法 |
| 2.5 数据分析和处理 |
| 3 结果 |
| 3.1 不同稀释液的保存效果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 稀释液配方对精子活力的影响 |
| 第四章 圆口铜鱼精子超低温冷冻技术与效果 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 样品采集 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 筛选稀释液 |
| 2.2.2 抗冻剂筛选 |
| 2.2.3 不同激活液中冻精质量检测 |
| 2.3 数据处理 |
| 3 结果 |
| 3.1 不同稀释液对圆口铜鱼精子活力的影响 |
| 3.2 抗冻剂对精子快速运动、寿命、活率的影响 |
| 3.3 不同浓度不同种类的抗冻剂对精子运动速率的影响 |
| 3.4 激活液中Na~+对冻精质量的影响 |
| 4 讨论 |
| 4.1 稀释液对精子活力的影响 |
| 4.2 抗冻剂种类和浓度对精子活力的影响 |
| 4.3 Na~+对冷冻精子质量的影响 |
| 第五章 总结 |
| 参考文献 |
| 附录一 |
| 附录二 |
| 致谢 |
（7）不同抗氧化剂对地中海水牛精液冷冻保存效果的影响研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一部分 文献综述 |
| 1 地中海水牛研究现状 |
| 2 水牛精液冷冻保存研究概况 |
| 2.1 精液的冷冻保存原理 |
| 2.2 精液的冷冻损伤机理 |
| 2.3 精液稀释液中的添加剂 |
| 3 褪黑素、谷胱甘肽和维生素E的研究进展 |
| 3.1 褪黑素的研究进展 |
| 3.2 谷胱甘肽的研究进展 |
| 3.3 维生素E的研究进展 |
| 4 研究目的和意义 |
| 第二部分 试验研究 |
| 第一章 地中海水牛精液冷冻稀释液配方的改进研究 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.3 试验设计 |
| 1.4 数据处理 |
| 2 结果分析 |
| 2.1 试验水牛的筛选 |
| 2.2 E61水牛精液冷冻前的基本情况 |
| 2.3 不同抗生素对水牛精液的抑菌效果比较 |
| 2.4 不同稀释液成分对水牛精液品质的影响 |
| 2.5 不同浓度BSA对水牛精液品质的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第二章 褪黑素、谷胱甘肽和维生素E对地中海水牛精液冷冻保存效果的影响研究 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.3 试验设计 |
| 1.4 数据处理 |
| 2 结果分析 |
| 2.1 水牛精液冷冻前的基本情况 |
| 2.2 褪黑素对水牛精子冻后活率、运动性能和顶体完整率等的影响 |
| 2.3 不同浓度褪黑素对冷冻解冻后水牛精子抗氧化物酶活性的影响 |
| 2.4 不同浓度褪黑素对解冻后水牛精子体外受精的分裂率和囊胚率的影响 |
| 2.5 谷胱甘肽对水牛精子冻后活率、运动性能和顶体完整率等的影响 |
| 2.6 不同浓度谷胱甘肽对冷冻解冻后水牛精子抗氧化物酶活性的影响 |
| 2.7 不同浓度谷胱甘肽对解冻后水牛精子体外受精的分裂率和囊胚率的影响 |
| 2.8 维生素E对水牛精子冻后活率、运动性能和顶体完整率等的影响 |
| 2.9 不同浓度维生素E对冷冻解冻后水牛精子抗氧化物酶活性的影响 |
| 2.10 不同浓度维生素E对解冻后水牛精子体外受精的分裂率和囊胚率的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 第三章 三种抗氧化剂配伍作用对地中海水牛精液冷冻保存效果的影响研究 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验材料 |
| 1.2 试验方法 |
| 1.3 试验设计 |
| 1.4 数据处理 |
| 2 结果分析 |
| 2.1 E13水牛精液冷冻前的基本情况 |
| 2.2 抗氧化剂组合对水牛精子活率、畸形率的影响 |
| 2.3 抗氧化剂组合对水牛精子冻后运动性能、顶体完整率和质膜完整率的影响 |
| 2.4 不同抗氧化剂组合对水牛精子冻后体外受精的分裂率和囊胚率的影响 |
| 3 讨论 |
| 4 小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 中英文缩略词表 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 |
（8）四种抗氧化剂对山羊精液冷冻保存效果的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 文献综述 |
| 第一章 羊精液冷冻保存技术研究进展 |
| 1.1 羊精液冷冻技术研究概况 |
| 1.2 精液冷冻保存原理 |
| 1.3 精子冷冻损伤机制 |
| 1.4 影响羊精液冷冻保存效果的因素 |
| 1.4.1 冷冻稀释液 |
| 1.4.2 冷冻保护剂 |
| 1.4.3 冷冻程序 |
| 1.5 羊精液冷冻保存技术展望 |
| 第二章 精子氧化损伤机制及抗氧化剂的分类 |
| 2.1 精子氧化损伤机制 |
| 2.1.1 活性氧（ROS）概述 |
| 2.1.2 精液中ROS的来源 |
| 2.1.3 ROS对精子的损伤 |
| 2.2 抗氧化剂的分类 |
| 2.2.1 酶类抗氧化剂 |
| 2.2.2 非酶类抗氧化剂 |
| 2.3 本研究的目的和意义 |
| 试验研究 |
| 第三章 番茄红素和 α-硫辛酸对山羊精液冷冻保存效果的影响 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 主要试剂与仪器设备 |
| 3.1.2 试验动物 |
| 3.1.3 主要溶液的配制 |
| 3.1.4 精液处理 |
| 3.1.5 试验设计 |
| 3.1.6 精子品质检测 |
| 3.1.7 数据统计分析 |
| 3.2 结果与分析 |
| 3.2.1 番茄红素对山羊精液冷冻保存效果的影响 |
| 3.2.2 α-硫辛酸对山羊精液冷冻保存效果的影响 |
| 3.2.3 番茄红素和 α-硫辛酸联合添加对山羊精液冷冻保存效果的影响 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 第四章 海带多糖和枸杞多糖对山羊精液冷冻保存效果的影响 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.1.1 主要试剂与仪器设备 |
| 4.1.2 试验动物 |
| 4.1.3 主要溶液的配制 |
| 4.1.4 精液处理 |
| 4.1.5 试验设计 |
| 4.1.6 精子品质检测 |
| 4.1.7 数据统计分析 |
| 4.2 结果与分析 |
| 4.2.1 海带多糖对山羊精液冷冻保存效果的影响 |
| 4.2.2 枸杞多糖对山羊精液冷冻保存效果的影响 |
| 4.2.3 海带多糖和枸杞多糖联合添加对山羊精液冷冻保存效果的影响 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 小结 |
| 第五章 不同抗氧化剂对山羊精子冻后SOD、CAT和GSH-Px活性的影响 |
| 5.1 材料与方法 |
| 5.1.1 主要试剂与仪器设备 |
| 5.1.2 试验动物 |
| 5.1.3 主要溶液的配制 |
| 5.1.4 精液处理 |
| 5.1.5 试验设计 |
| 5.1.6 精子抗氧化酶活性的测定 |
| 5.1.7 数据统计分析 |
| 5.2 结果与分析 |
| 5.2.1 番茄红素和 α-硫辛酸对山羊精子冻后SOD、CAT和GSH-Px活性的影响 |
| 5.2.2 海带多糖和枸杞多糖对山羊精子冻后SOD、CAT和GSH-Px活性的影响 |
| 5.3 讨论 |
| 5.4 小结 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
（9）几种海洋经济动物种质资源超低温冷冻保存研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 第一章 文献综述 |
| 1. 海洋动物种质冷冻保存研究意义 |
| 2. 海洋动物种质超低温保存的研究现状 |
| 2.1 鱼类精子冷冻保存技术研究现状 |
| 2.2 贝类精子冷冻保存技术研究现状 |
| 2.3 海水鱼类胚胎冷冻保存技术研究现状 |
| 2.4 贝类胚胎和卵子冷冻保存技术研究现状 |
| 3. 冷冻保存对海洋动物种质质量影响的研究现状 |
| 4. 冷冻保存对种质形态结构的影响 |
| 5. 冷冻保存时间对种质生理活性的影响 |
| 6. 本研究的内容和意义 |
| 第二章 太平洋鳕精液超低温冷冻方法的建立及精子超微结构分析 |
| 1. 材料和方法 |
| 1.1 样品采集 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 鲜精与冻精的活力测定 |
| 1.4 鲜精与冻精的超微结构观察 |
| 1.5 数据处理 |
| 2. 结果 |
| 2.1 添加剂蛋黄对精子运动率的作用 |
| 2.2 抗冻剂种类和浓度对运动率的影响 |
| 2.3 抗冻剂种类和浓度对精子活力的影响 |
| 2.4 抗冻剂种类和浓度对运动率的影响 |
| 2.4.1 扫描电镜观察结构正常和异常的精子 |
| 2.4.2 透射电镜观察结构正常和结构异常的精子 |
| 3. 讨论 |
| 3.1 抗冻剂种类和浓度对运动率的影响 |
| 3.2 抗冻剂种类和浓度对精子活力的影响 |
| 3.3 抗冻剂种类和浓度对精子运动速度的影响 |
| 3.4 太平洋鳕鲜精及冻精的超微结构 |
| 4. 小结 |
| 第三章 条纹锯鮨精液超低温冷冻保存研究 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 样品采集 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 鲜精与冻精的活力测定 |
| 1.4 数据处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 抗冻剂种类和浓度对精子运动率的影响 |
| 2.2 抗冻剂种类和浓度对精子运动性能的影响 |
| 2.3 不同浓度不同种类的抗冻剂对精子激活后运动率的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 抗冻剂种类和浓度对精子运动率的影响 |
| 3.2 抗冻剂种类和浓度对精子运动速度的影响 |
| 3.3 不同浓度和种类抗冻剂激活时间对精子运动率的影响 |
| 第四章 太平洋牡蛎精液的超低温保存研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 太平洋牡蛎的采集 |
| 1.2 精液活力的检测 |
| 1.3 抗冻保护液的配制 |
| 1.4 实验设计 |
| 1.4.1 抗冻保护剂种类对太平洋牡蛎精液冷冻保存的影响 |
| 1.4.2 抗冻剂浓度对太平洋牡蛎精液冷冻保存效果的影响 |
| 1.4.3 三种稀释液对精液冷冻效果的影响 |
| 1.4.4 精液与抗冻液稀释比例对太平洋牡蛎精液冷冻保存效果的影响 |
| 1.4.5 不同降温程序对精液冷冻保存效果的影响 |
| 1.4.6 抗冻添加剂对精液冷冻效果的影响 |
| 1.4.7 受精率和孵化率的测定 |
| 1.4.8 统计分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 抗冻剂种类对太平洋牡蛎精液冷冻保存效果的影响 |
| 2.2 抗冻剂浓度对太平洋牡蛎精液保存效果的影响 |
| 2.3 稀释液种类对太平洋牡蛎精液保存效果的影响 |
| 2.4 不同稀释比例对太平洋牡蛎精液保存效果的影响 |
| 2.5 不同添加剂对太平洋牡蛎精液保存效果的影响 |
| 2.6 不同降温程序对太平洋牡蛎精液保存效果的影响 |
| 2.7 太平洋牡蛎精液超低温保存对受精率和孵化率的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 不同抗冻剂种类对太平洋牡蛎精液保存效果的影响 |
| 3.2 不同抗冻剂浓度对太平洋牡蛎精液保存效果的影响 |
| 3.3 不同稀释液对太平洋牡蛎精液保存效果的影响 |
| 3.4 不同稀释比例对太平洋牡蛎精液保存效果的影响 |
| 3.5 不同添加剂对太平洋牡蛎精液保存效果的影响 |
| 3.6 不同降温速率对太平洋牡蛎精液保存效果的影响 |
| 3.7 太平洋牡蛎精液超低温冷冻对受精率和孵化率的影响 |
| 第五章 太平洋牡蛎精子超低温冷冻后超微结构损伤研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.2.1 精子的超低温冻存及解冻 |
| 1.2.2 鲜精与冻精的活力测定 |
| 1.2.3 受精率和孵化率的测定 |
| 1.2.4 鲜精与冻精的超微结构观察 |
| 1.3 数据处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 太平洋牡蛎鲜精及冻精的受精率、孵化率及运动率 |
| 2.2 太平洋牡蛎鲜精及冻精的超微结构 |
| 2.2.1 太平洋牡蛎精子冷冻前后扫描电镜超微结构 |
| 2.2.2 太平洋牡蛎精子冷冻前后透射电镜超微结构 |
| 3 讨论 |
| 4. 小结 |
| 第六章 太平洋牡蛎担轮幼虫的超低温保存研究 |
| 1. 材料与方法 |
| 1.1 太平洋牡蛎担轮幼虫的采集 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 太平洋牡蛎担轮幼虫活力测定 |
| 1.4 数据处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 不同浓度及种类的抗冻保护剂对太平洋牡蛎担轮幼虫的毒性作用 |
| 2.2 抗冻保护剂浓度及种类对太平洋牡蛎担轮幼虫超低温保存的影响 |
| 2.3 太平洋牡蛎担轮幼虫超低温保存方法的筛选 |
| 3 讨论 |
| 3.1 抗冻保护剂种类和浓度对太平洋牡蛎担轮幼虫的毒性作用 |
| 3.2 太平洋牡蛎担轮幼虫的超低温保存 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 论文及专利发表情况 |
（10）太平洋牡蛎（Crassostrea gigas）担轮幼虫的超低温保存研究（论文提纲范文）
| 1 材料与方法 |
| 1.1 太平洋牡蛎担轮幼虫的采集 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 太平洋牡蛎担轮幼虫活力测定 |
| 1.4 数据处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 不同浓度及种类的抗冻保护剂对太平洋牡蛎担轮幼虫的毒性作用 |
| 2.2 抗冻保护剂浓度及种类对太平洋牡蛎担轮幼虫超低温保存的影响 |
| 2.3 太平洋牡蛎担轮幼虫超低温保存方法的筛选 |
| 3 讨论 |
| 3.1 抗冻保护剂种类和浓度对太平洋牡蛎担轮幼虫的毒性作用 |
| 3.2 太平洋牡蛎担轮幼虫的超低温保存 |
四、抗冻保护剂的不同浓度对黑熊精液冷冻保存效果的研究（论文参考文献）
- [1]牛磺酸对湖羊精液常温保存效果的研究[D]. 张柳明. 扬州大学, 2021(09)
- [2]大豆卵磷脂和原花青素在山羊精液冷冻中的应用研究[D]. 范文华. 上海海洋大学, 2020
- [3]花旗松素、山奈酚和根皮素对猪精子保存效果的影响[D]. 刘定帮. 西北农林科技大学, 2020(02)
- [4]圆口铜鱼精子超低温冷冻保存[J]. 刘光霞,吴兴兵,何勇凤,邓智明,杨德国,王小明,杨少荣,刘欢. 中国水产科学, 2020(01)
- [5]猪精液超低温冷冻保存研究进展[J]. 吴梦,刘雪芹,刘子嘉,肖普英,丁玉春,刘作华,葛良鹏. 中国畜牧杂志, 2019(07)
- [6]圆口铜鱼精子冷冻保存技术研究[D]. 刘光霞. 上海海洋大学, 2019(03)
- [7]不同抗氧化剂对地中海水牛精液冷冻保存效果的影响研究[D]. 吴大平. 广西大学, 2017(01)
- [8]四种抗氧化剂对山羊精液冷冻保存效果的影响[D]. 王艳华. 西北农林科技大学, 2016(11)
- [9]几种海洋经济动物种质资源超低温冷冻保存研究[D]. 韩龙江. 中国海洋大学, 2015(08)
- [10]太平洋牡蛎（Crassostrea gigas）担轮幼虫的超低温保存研究[J]. 韩龙江,刘清华,纪利芹,温海深,黄雯,张国范,李军. 海洋与湖沼, 2014(06)