一、金标试纸条与ELISA法检测HBsAg的比较(论文文献综述)
刘佳璇[1](2020)在《旋毛虫ELISA检测方法的建立及其血清流行病学的应用研究》文中提出目的采用旋毛虫肌幼虫排泄分泌物(ES)作为包被抗原,建立酶联免疫吸附试验(ELISA)检测方法,检测小鼠血清中的IgG和IgM抗体,为旋毛虫病的诊断提供依据。建立人血清中旋毛虫抗体ELISA检测方法,并将此法应用于郑州献血人群旋毛虫抗体筛查,分析郑州市献血人群中旋毛虫病的流行现状,为做好旋毛虫病的防控工作提供策略支持和理论参考依据。方法收集旋毛虫肌幼虫抗原,并绘制蛋白定量标准曲线,测得所提取的抗原浓度,应用棋盘滴定法选择最佳抗原包被浓度,血清稀释度,酶结合物稀释度,以及其他最适宜的反应条件,分别建立起IgM和IgG抗体的ELISA检测方法。最后评价该方法的准确性、敏感性、特异性及重复性。建立人血清中旋毛虫抗体的ELISA检测方法并检测5836人份献血人群中的旋毛虫感染率,对阳性者进行电话回访,按区域、年龄、性别、学历、职业、饮食及卫生习惯等进行分类统计,对献血人群中流行情况进行分析研究。结果旋毛虫ELISA方法的建立结果。1)通用参数优化:封闭剂为5%脱脂奶粉,封闭时间为120min;显色剂四甲基联苯胺浓度为0.4g/L;血清一抗、酶标二抗以及底物显色反应时间依次为:60min、30min、30min。2)检测鼠旋毛虫IgG参数为:ES抗原包被浓度为1μg/ml,被检血清最佳稀释度为1:100,羊抗鼠IgG酶标抗体稀释度为1:6000。临界值Cut off=0.21。在特异性实验中未出现假阳性,重复性小于15%,准确度达100%,敏感性达到1:3200。3)检测鼠旋毛虫IgM参数为:ES抗原包被浓度为1μg/ml、被检血清稀释度为1:100,羊抗鼠IgM酶标抗体稀释度为1:2500。临界值Cut off=0.25。4)检测人旋毛虫IgG参数优选为:ES抗原包被浓度0.77μg/ml,羊抗人IgG酶标抗体浓度为1:2000,血清稀释度1:20,临界值Cut off=0.16。献血人群旋毛虫流行病学调查结果。检测郑州市献血者5836人,旋毛虫抗体阳性59人,阳性率为1.01%。不同区域之间旋毛虫抗体阳性率差异有统计学意义(χ2=20.718,P=0.036),以管城区旋毛虫抗体阳性率(2.69%)最高,新密市最低(0.38%)。不同的年龄组之间旋毛虫抗体阳性率差异有统计学意义(χ2=21.584,P=0.001),36-45 岁旋毛虫抗体阳性率最高为 1.69%(26/1538),18-25岁最低为0.32%(3/938);36岁以上年龄组旋毛虫抗体阳性率是1.55%(50/3226),36岁以下年龄组阳性率是0.35%(9/2610)。男性旋毛虫抗体阳性率1.18%(50/4254)高于女性旋毛虫抗体阳性率0.57%(9/1582),两者差异具有统计学意义χ2=4.238,P=0.038)。不同的学历之间旋毛虫抗体阳性率差异有统计学意义(χ2=12.163,P=0.033),小学文化程度旋毛虫抗体阳性率最高(2.41%),本科生最低(0.33%)。不同职业旋毛虫抗体阳性率差异有统计学意义(χ2=40.456,P=0.001),农民旋毛虫抗体阳性率最高3.37%(28/831),医务工作者最低0.21%(1/467)。献全血和血小板人群的旋毛虫阳性率差异无统计学意义(χ2=0.204,P=0.651)。偶吃生食或半生食物肉类的人群旋毛虫抗体阳性率高于从不吃生食或半生食物肉类的人,差别有统计学意义(χ2=32.198,P=0.001);加工生肉与熟食所用刀和板,不分开使用者旋毛虫抗体阳性率高于分开使用者,差别有统计学意义(χ2=20.574,P=0.001)。结论1.成功建立了 ELISA法检测小鼠血清旋毛虫IgG和IgM抗体以及检测献血者旋毛虫IgG抗体,通过增加TMB显色剂的浓度,降低ES抗原的包被量,从而提高其敏感性和特异性,该法不但适用于旋毛虫病的诊断和流行病学调查,而且可减少大量献血者旋毛虫抗体检测的费用。2.郑州市献血人群中旋毛虫感染率属于低流行区,36岁以上人群感染率较高,男性感染率大于女性,小学文化程度以及农民感染率最高。旋毛虫感染率还与不良饮食和卫生习惯不当有关,应加强卫生宣传和检疫防控工作。
魏延民,孙波,高志刚,赵莉,张然[2](2018)在《机采血小板献血初筛使用乙肝表面抗原/梅毒螺旋体抗体试纸条对复检结果的影响》文中提出目的探讨机采血小板采血前使用HBsAg/梅毒螺旋体(TP)抗体试纸条初筛对复检中HBsAg和TP抗体结果的影响。方法 2014—2015年机采血小板采血前初筛使用HBsAg单一试纸条,初筛合格的标本53 974例进入复检(A组);2016—2017年初筛使用HBsAg/TP抗体试纸条,复检标本60 065例(B组)。比较两组HBsAg、TP抗体阳性率及HBsAg、TP抗体阳性结果中双试剂阳性的比例。结果与A组相比,B组HBsAg与TP抗体阳性率均降低(P<0.01)。B组HBsAg与TP抗体阳性结果中双试剂阳性比例均较A组降低(P<0.05或P<0.01)。结论机采血小板采血前使用HBsAg/TP抗体试纸条初筛可以降低复检中HBsAg和TP抗体阳性率及阳性结果中双试剂阳性的比例。
张巧云,邵峰[3](2018)在《宁夏地区HBsAg/TP联合金标试纸条法的应用分析》文中指出目的评估HBsAg/TP联合金标试纸条法在献血者初筛中的应用效果。方法在宁夏地区献血者初筛中应用HBsAg/TP联合金标试纸条法筛查,对不合格样本采用ELISA检测和TPPA试剂进行确认比对分析;采用HBsAg/TP联合金标试纸条法检测HBsAg、梅毒抗体血清盘样本,比对分析灵敏度和特异性。结果应用HBsAg/TP联合检测金标试纸条法对HBsAg检测的灵敏度为82%,特异性为100%,与HBsAg试纸条法总体符合率为100%;梅毒抗体的灵敏度为100%(25/25),特异性为100%(22/22),与TPPA总体符合率为97.18%;对20份混合标本和100份阴性标本也全部达到预期效果(20/20,100/100);开展HBsAg/TP初筛后,HBsAg、抗-TP阳性率均有明显下降。结论该试纸条操作简单、快速,检测性能良好,有效降低血液报废率,更适用于街头条件简陋的采血点,适合用于街头献血者梅毒与乙肝的联合初筛检测,是血站开展献血前筛查的理想方法,在血站系统有好的适用性和推广价值。
黄伯泉,黄志健,王淏,姜津,杜荣松,李仲平,梁浩坚,谢君谋[4](2017)在《两种金标试纸条能效比对及经济效益分析》文中研究说明目的探讨本中心HBsAg金标试纸条与HBsAg/TP联检金标试纸条筛查能效,分析无偿献血者采血前采用HBsAg/TP联检金标试纸条筛查所产生的经济效益。方法使用本中心在用HBsAg金标试纸条(A)与测评HBsAg/TP联检金标试纸条(B)对2013-2016年ELISA双试剂检测HBsAg或TP阳性部分标本进行检测,比对两种试纸条对HBsAg检测能效,统计B对TP的检出率,以本中心为例分析B所产生经济效益。结果 A对HBsAg-ELISA阳性标本的阳性检出率为53.2%(430/808),B对HBsAg-ELISA阳性标本的阳性检出率为52.2%(422/808),P>0.05,无显着差异,效能一致;B能有效筛查出TP阳性标本(TPPA确证阳性),TP阳性检出率为90.4%(322/356);以本中心为例,使用HBsAg/TP联检金标试纸条作为献血者献血前的筛查模式经济效益明显。结论 HBsAg/TP联检金标试剂与HBsAg金标试纸条效能一致,而且能很好的筛查出TP,实际使用价值和经济效益明显,特向广大同行推广。
蔡县成,叶青,刘芳菲,洪智林[5](2017)在《无偿献血者献血前梅毒螺旋体抗体快速检测结果分析及策略优化》文中研究指明目的回顾性分析无偿献血者献血前梅毒螺旋体(TP)快速检测的结果,优化献血前筛查策略。方法献血前采用TP金标试纸条对献血者进行快速检测,献血后采用TP-酶联免疫吸附测定(ELISA)法对血液进行检测。比较开展TP快速检测前、后血液TP阳性报废率。对TP快速检测阳性献血者的献血次数、献血间隔时间以及假性结果等内容进行分析。结果2014-2015年献血前TP快速检测73 990例,阳性529例,阳性率为0.71%,其中初次献血者阳性472例,占89.2%,献血间隔时间超过3年者阳性35例,占重复献血者阳性的61.4%。TP快速检测假阳性5例,假阴性15例。开展TP快速检测后,献血者血液检测抗TP阳性报废率由0.71%下降至0.17%。结论开展献血前TP快速检测能有效降低血液TP阳性报废率;结合献血者献血次数、献血间隔时间,优化献血前筛查策略,能提升献血服务效率及水平。
黄腊梅,肖雯[6](2016)在《HBsAg/TP联合金标试纸条用于筛查街头无偿献血者的效果分析》文中研究说明目的使用乙型肝炎表面抗原(HBsAg)/梅毒螺旋体(TP)联合金标试纸条筛查街头无偿献血者HBsAg、TP,防止HBsAg、TP强阳性无偿献血者进入采血程序,降低血液总报废率,减少血液资源浪费;降低工作人员HBsAg、TP职业暴露风险。方法酶联免疫吸附试验(ELISA)检测无偿献血者HBsAg、TP,比较献血前使用HBsAg/TP联合金标试纸条与单独使用HBsAg金标试纸条两者阳性率变化情况。结果献血前使用HBsAg/TP联合金标试纸条筛查TP后,无偿献血者TP阳性率由2014年的1.21%下降至2015年25月的0.54%(P<0.05);献血前使用HBsAg/TP联合金标试纸条筛查HBsAg与单独使用HBsAg金标试纸条阳性率变化差异无统计学意义(P>0.05)。结论献血前使用HBsAg/TP联合金标试纸条检测,相比单独使用HBsAg金标试纸条检测,无偿献血者HBsAg阳性率无明显变化,但TP阳性率大幅度降低,减少了血液资源的浪费、工作人员TP职业暴露风险。由于其操作简单、快速、用血量小,值得在TP阳性率高的血站推广。
李明[7](2015)在《噻虫胺抗体制备及免疫分析方法研究》文中提出免疫分析是一种简单、快速、灵敏、低成本、高通量的检测技术,已经成为当前农产品质量安全检测领域的研发热点和发展趋势之一。本论文以新烟碱类杀虫剂噻虫胺为研究对象,制备多种类型抗体,建立多种免疫分析方法并且应用于农产品和环境样品中噻虫胺残留分析。研究结果可以为噻虫胺残留检测免疫试剂盒和试纸条的开发提供可靠的理论依据和数据支持,为农药等小分子快速检测提供新的研究思路。主要研究内容如下:1、噻虫胺抗体制备以噻虫胺与巯基丙酸反应合成噻虫胺半抗原,将噻虫胺半抗原分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联制备免疫抗原和包被抗原。用免疫抗原免疫新西兰雄性大白兔,从血清中纯化获得多克隆抗体(PcAb),效价和亲和力分别为4.096×106和1.15×109 L/mol。将免疫后的BALB/c雌性小白鼠脾脏细胞和Sp2/0骨髓瘤细胞融合,对阳性克隆进行筛选和亚克隆,获得的杂交瘤细胞株(2B5C9G3)能够稳定分泌抗噻虫胺的单克隆抗体(McAb)。该McAb抗体为IgG3型,轻链为kappa链;效价为2.56×105,亲和力为9.95×107L/mol。制备获得的多克隆抗体和单克隆抗体均属于高亲和力抗体,可以用于噻虫胺免疫分析方法建立的材料。从杂交瘤细胞株2B5C9G3中扩增抗体重链可变区基因(VH)和轻链可变区基因(VL),通过Linker基因片段连接获得单链可变区基因(ScFv)。将获得的ScFv插入噬菌粒载体pComb3XSS,电转化到大肠杆菌E.coli K12 ER2738,在辅助噬菌体M13K07作用下,获得特异性识别噻虫胺的噬菌体单链抗体(Phage-ScFv)。该Phage-ScFv基本保留了单克隆抗体的属性,可以作为噻虫胺免疫分析中传统抗体的替代。Phage-ScFv的制备和研究将噻虫胺抗体的基因型和表型统一,为进一步研究抗原抗体作用机理、抗体进化、定量构效等提供了重要的信息和材料。2、噻虫胺酶联免疫吸附分析方法研究在最优免疫反应条件下,建立了基于三种抗体的噻虫胺间接竞争酶联免疫吸附分析方法(ELISA)。PcAb-ELISA法抑制中浓度(IC50)为46.0 ng/mL,最低检测限(LOD,IC10)为1.08 ng/mL;McAb-ELISA法IC50为25.6 ng/mL,LOD为3.84 ng/mL;Phage-ScFv-ELISA法IC50为62.3 ng/mL,LOD为8.43 ng/mL。仅对呋虫胺有较大交叉反应率(CR分别为11.8%、46.5%和51.9%),对其它噻虫胺结构类似化合物没有明显的交叉反应。此外,对方法的准确度、精密度和相关性进行了研究。结果表明建立的三种噻虫胺ELISA方法均简便快速,且具有很高特异性和准确性,能够应用于农业和环境样品中噻虫胺残留检测。3、噻虫胺化学发光酶免疫分析方法研究用化学发光体系为免疫反应信号检测模式,在最佳优化条件下,建立了基于多克隆抗体的噻虫胺化学发光酶免疫分析方法(CLEIA)。方法的IC50为14.8ng/mL,LOD 0.66 ng/mL。除了对呋虫胺有较大交叉反应外(9.4%),与其他噻虫胺结构类似化合物没有明显的交叉反应。在河水、土壤、大米、甘蓝和番茄空白样品中噻虫胺的添加回收率为76.4%-107.4%,相对标准偏差为2.9-9.4%。CLEIA法和GC法检测真实样品中噻虫胺残留的结果相关性很高(R2=0.9899)。建立的噻虫胺CLEIA法比同种抗体ELISA法灵敏度提高3倍,可以作为农产品中噻虫胺残留检测的一种理想分析工具。4、噻虫胺荧光免疫分析方法研究在荧光免疫分析研究方面,建立了噻虫胺时间分辨荧光免疫分析方法(TRFIA)、噻虫胺和噻虫啉同时检测的量子点荧光免疫分析方法(FLISA)和噻虫胺荧光偏振免疫分析方法(FPIA)。在最优条件下,建立方法的标准曲线,TRFIA法的IC50和LOD分别为2.07和0.022 ng/mL;FLISA法的IC50和LOD分别为12.5和0.301 ng/mL,检测噻虫啉的IC50和LOD分别为9.27和0.447 ng/mL;FPIA法的IC50和LOD分别为87.3和5.53 ng/mL。三种方法均通过交叉反应率、添加回收率和与仪器分析法相关性验证实验,评价方法的特异性、准确性和精确性。结果表明TRFIA法在灵敏度方面得到了显着提高,属于高灵敏检测方法;FLISA法可以同时对噻虫胺和噻虫啉残留定性定量检测;FPIA法无需分离洗涤步骤,在检测时间、操作步骤、示踪物稳定性方面显示出明显的优势;建立的三种荧光免疫分析方法简单快速、灵敏度高、特异性强、准确度高,能够应用于农业和环境样品中的噻虫胺残留高通量筛选检测。5、噻虫胺金标试纸条免疫层析分析方法研究在单克隆抗体和胶体金制备基础上建立了一种简便快速检测噻虫胺的金标试纸条免疫层析分析方法(GICA)。方法检测噻虫胺可以在10分钟内实现可视化判读,最低检测限为8 ng/mL,仅呋虫胺对检测有干扰(CR约为50%)。评价了不同种类样品的基质效应、方法的灵敏度、准确性、相关性和便捷性。与ELISA法相比,GICA法在检测时间、检测程序、结果显示、检测场地方面均有很大的优势。建立GICA简单快速、灵敏度高、成本低,可以用于环境和农业样品中噻虫胺残留的半定量检测,为噻虫胺商品化试纸条的开发和现场快速检测的应用具有重要意义。
陈长荣,欧山海,林永财,宋秀宇[8](2014)在《HBsAg/TP联合检测金标试纸条在献血者初筛中的应用》文中进行了进一步梳理目的评估1种HBsAg/TP联合检测金标试纸条的检测性能,及应用于献血者采血前初筛的可行性。方法用HBsAg/TP金标试纸条分别检测抗-TP阳性标本、HBsAg阳性标准品、HBsAg阳性标本、HBsAg/TP混合阳性标本以及阴性标本;在献血者献血前应用HBsAg/TP金标试纸条进行初筛后,分析献血者抗-TP和HBsAg阳性率的变化情况。结果 HBsAg/TP金标试纸条对105份抗-TP阳性标本的检测与TPPA法的阳性符合率为100%,总体符合率为97.14%;对HBsAg阳性标准品的检测达到0.56 IU/mL;对115份不同浓度的HBsAg阳性标本的检测与HBsAg金标试纸条的结果相当(89/115 vs 91/115);对30份HBsAg/TP混合阳性标本以及100份阴性标本的检测结果也都达到预期(30/30,100/100);在献血者献血前应用HBsAg/TP金标试纸条进行初筛后,献血者抗-TP阳性率与之前相比有明显下降,而HBsAg的阳性率无明显变化。结论该HBsAg/TP金标试纸条操作简便,检测性能良好,适合替代HBsAg金标试纸条应用于献血前的初筛。
谢云,冯惟萍,李国英[9](2014)在《胶体金法、ELISA法检测HBsAg在献血者初筛中的作用》文中研究说明目的:评价胶体金免疫层析法、酶联免疫法在献血者初筛检测中HBsAg阳性的效果,指导采集安全的血液,减少血液资源的浪费。方法:将经过金标法初筛后献血的所有血液样本,用两种ELISA试剂(一种为进口试剂、一种为国产试剂)检测,对有反应性或在灰区(S/CO值≥0.5)的标本,确定为阳性样本共152份,再次用金标法检测。结果:再次经金标试纸条检测,阳性标本为35份,符合率为23%。结论:胶体金法与ELISA法在HBsAg的检测上有一定的符合性,说明ELISA的特异性较高,敏感性强,操作方便;在献血者检测HBsAg阳性确认中使用最为广泛和经典方法,胶体金法在献血者献血前的初筛中起到第一道屏障作用。
王林[10](2013)在《胶体金免疫层析法检测HBsAg在无偿献血中的应用》文中提出目的探讨流动采血车上胶体金免疫层析法检测无偿献血者HBsAg的应用效果。方法无偿献血者献血前,在采血车上用胶体金免疫层析法检测HBsAg;献血后在检验科应用酶联免疫吸附试验(ELISA),进行HBsAg初检、复检两次检测。结果胶体金免疫层析法初筛无偿献血者HBsAg,其阳性率平均为9.58%。以酶联免疫吸附试验检测结果为准,65256份无偿献血者血液标本共检出阳性163份,胶体金免疫层析法漏检率为0.25%。结论在无偿献血工作前应用胶体金免疫层析法筛查HBsAg,可明显减少HBsAg阳性血液的采集,可明显提高血液质量保障输血安全,胶体金免疫层析法适合于大批量无偿献血者的快速筛查。
二、金标试纸条与ELISA法检测HBsAg的比较(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、金标试纸条与ELISA法检测HBsAg的比较(论文提纲范文)
(1)旋毛虫ELISA检测方法的建立及其血清流行病学的应用研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
英文名词对照表 |
前言 |
1 材料 |
1.1 旋毛虫虫种 |
1.2 实验小白鼠 |
1.3 试验血清 |
1.4 仪器耗材 |
1.5 实验试剂 |
2 方法 |
2.1 旋毛虫肌幼虫的收集 |
2.2 人工消化液的配置 |
2.3 排泄分泌ES抗原的制备 |
2.4 Bradford法测蛋白含量 |
2.5 ELISA操作方法 |
2.6 小鼠血清旋毛虫ELISA法实验条件优化 |
2.7 人血清旋毛虫ELISA法实验条件优化 |
2.8 献血人群中旋毛虫感染率的流行病学调查 |
3 实验结果 |
3.1 旋毛虫肌幼虫显微镜观察结果 |
3.2 小鼠血清旋毛虫IgG抗体ELISA方法的建立 |
3.3 小鼠血清旋毛虫IgM抗体ELISA方法的建立 |
3.4 人血清旋毛虫IgG抗体ELISA方法的建立 |
3.5 献血人群中旋毛虫感染情况分析 |
4 讨论 |
结论 |
参考文献 |
综述 全球旋毛虫病流行现状及检测方法研究进展 |
参考文献 |
个人简历、硕士期间发表的学术论文 |
主要学习经历 |
主要经历 |
致谢 |
(2)机采血小板献血初筛使用乙肝表面抗原/梅毒螺旋体抗体试纸条对复检结果的影响(论文提纲范文)
资料与方法 |
1.一般资料 |
2.方法 |
3.统计学处理 |
结果 |
1.复检HBsAg及TP抗体阳性率 |
2.复检HBsAg阳性标本中双试剂阳性所占比例 |
3.复检TP抗体阳性标本中双试剂阳性所占比例 |
讨论 |
(3)宁夏地区HBsAg/TP联合金标试纸条法的应用分析(论文提纲范文)
1 资料与方法 |
1.1 一般资料: |
1.2 试剂: |
1.3 仪器设备: |
1.4 方法: |
2 结果 |
3 讨论 |
(4)两种金标试纸条能效比对及经济效益分析(论文提纲范文)
1 材料方法 |
1.1 研究对象 |
1.2 试剂与仪器 |
1.3 方法 |
1.4 统计学方法 |
2 结果 (表1-4) |
3 讨论 |
(5)无偿献血者献血前梅毒螺旋体抗体快速检测结果分析及策略优化(论文提纲范文)
1 资料与方法 |
1.1 一般资料 |
1.2 仪器与试剂 |
1.3 方法 |
1.3.1 TP快速检测 |
1.3.2 TP-ELISA检测 |
1.3.3 TP快速检测结果的假性判定 |
1.4 统计学处理 |
2 结果 |
2.1 TP阳性报废率的比较 |
2.2 不同献血次数人群TP快速检测结果的比较 |
2.3 复检结果 |
3 讨论 |
(6)HBsAg/TP联合金标试纸条用于筛查街头无偿献血者的效果分析(论文提纲范文)
1 资料与方法 |
1.1 一般资料本站2009~2014 年无偿献血者血液标本94 720例。2015年2~5月无偿献血者血液标本6 888例。 |
1.3 方法 |
2 结果 |
2.3 ELISA检测HBsAg、TP阴性标本使用HBsAg/TP试纸条阳性率选取20例2014年ELISA HBsAg、TP阴性标本, 按照HBsAg/TP试纸条使用说明书检测。结果均为阴性。 |
2.4 献血前使用HBsAg/TP试纸条初筛后效果分析见表1、2。 |
3 讨论 |
(7)噻虫胺抗体制备及免疫分析方法研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第一章 农药残留检测技术研究综述 |
1 免疫分析方法概述 |
2 农药等小分子化合物抗原制备研究进展 |
2.1 半抗原合成 |
2.2 人工抗原制备 |
3 农药等小分子化合物抗体制备研究进展 |
3.1 多克隆抗体 |
3.2 单克隆抗体 |
3.3 基因工程抗体 |
3.4 仿生抗体 |
4 噬菌体展示技术在免疫分析中的研究进展 |
4.1 应用于单链抗体表达 |
4.2 应用于噬菌体抗体库构建 |
4.3 应用于噬菌体多肽竞争物库构建 |
5 农药残留免疫分析方法质量控制 |
5.1 精密度 |
5.2 灵敏度 |
5.3 准确度 |
5.4 特异性 |
5.5 稳定性 |
5.6 样品基质效应 |
6 农药残留免疫分析方法研究进展 |
6.1 放射免疫分析 |
6.2 酶联免疫吸附分析 |
6.3 化学发光免疫分析 |
6.4 荧光免疫分析 |
6.5 试纸条免疫层析分析 |
6.6 多残留免疫分析 |
6.7 其他免疫分析 |
7 新烟碱类杀虫剂残留分析检测现状 |
7.1 新烟碱类杀虫剂概况 |
7.2 新烟碱类杀虫剂残留检测概况 |
8 噻虫胺残留分析检测现状 |
8.1 噻虫胺概况 |
8.2 噻虫胺残留检测概况 |
9 研究目的和意义 |
第二章 噻虫胺抗原和抗体制备 |
第一节 噻虫胺半抗原和人工抗原制备 |
1 实验材料 |
1.1 主要试剂 |
1.2 主要仪器 |
2 实验方法 |
2.1 半抗原的合成与鉴定 |
2.2 人工抗原的制备与鉴定 |
3 结果与分析 |
3.1 半抗原分子的结构鉴定 |
3.2 人工抗原偶联物结合比的测定 |
第二节 噻虫胺多克隆抗体(PcAb)制备 |
1 实验材料 |
1.1 主要试剂 |
1.2 主要仪器 |
1.3 缓冲溶液 |
2 实验方法 |
2.1 新西兰大白兔免疫 |
2.2 采血与测定 |
2.3 抗体效价测定 |
2.4 多克隆抗体纯化 |
2.5 抗体亲和力测定 |
3 结果与分析 |
3.1 多克隆抗体效价 |
3.2 多克隆抗体亲和力 |
第三节 噻虫胺单克隆抗体(McAb)制备 |
1 实验材料 |
1.1 主要试剂 |
1.2 主要仪器和生物材料 |
1.3 缓冲溶液 |
2 实验方法 |
2.1 BALB/c小白鼠免疫 |
2.2 效价测定与选择 |
2.3 杂交瘤细胞的制备 |
2.4 细胞冻存和复苏 |
2.5 小鼠腹水的制备 |
2.6 抗体纯化 |
2.7 单克隆抗体亚型鉴定 |
3 结果与分析 |
3.1 免疫脾细胞提供小白鼠选择 |
3.2 单克隆抗体亚型的鉴定 |
3.3 单克隆抗体效价 |
3.4 单克隆抗体亲和力 |
第四节 噻虫胺噬菌体单链抗体制备 |
1 实验材料 |
1.1 主要试剂 |
1.2 主要仪器 |
1.3 菌株及质粒 |
1.4 缓冲溶液 |
2 实验方法 |
2.1 杂交瘤细胞株总mRNA的提取 |
2.2 逆转录合成cDNA |
2.3 引物序列 |
2.4 抗体可变基因扩增 |
2.5 T载体构建 |
2.6 T载体(酶切位点)构建 |
2.7 电转化感受态细胞制备 |
2.8 噬菌粒pComb3XSS扩增 |
2.9 辅助噬菌体扩增 |
2.10 噬菌粒表达载体构建 |
2.11 噬菌体单链抗体表达与纯化 |
2.12 噬菌体单链抗体特异性和亲和性测定 |
2.13 噬菌体单链抗体基因序列测定 |
2.14 噬菌体单链抗体大量制备 |
3 结果与分析 |
3.1 杂交瘤细胞总mRNA的提取和鉴定 |
3.2 抗体V_H、V_L和Linker基因扩增 |
3.3 抗体ScFv基因扩增 |
3.4 抗体ScFv基因的T载体构建 |
3.5 抗体ScFv(SfiI酶切位点)基因扩增 |
3.6 抗体ScFv(SfiI酶切位点)基因的T载体构建 |
3.7 基因的SfiI酶酶切 |
3.8 噬菌粒表达载体验证 |
3.9 噬菌粒表达质粒ScFv(SfiI)基因片段测序 |
3.10 噬菌体单链抗体大量表达和滴度 |
3.11 噬菌体单链抗体的亲和性 |
4 本章结论与讨论 |
第三章 噻虫胺酶联免疫吸附分析方法研究 |
1 实验材料 |
1.1 主要试剂 |
1.2 主要仪器 |
1.3 缓冲溶液 |
第一节 基于多克隆抗体的噻虫胺ELISA方法研究 |
2 实验方法 |
2.1 噻虫胺酶标抗原制备 |
2.2 ELISA操作程序 |
2.3 免疫反应条件优化 |
2.4 标准曲线建立 |
2.5 交叉反应率测定 |
2.6 添加回收率测定 |
2.7 样品基质效应测定 |
2.8 真实样品测定 |
3 结果与分析 |
3.1 酶标抗原结合比测定 |
3.2 噻虫胺ELISA法条件优化 |
3.3 灵敏度 |
3.4 精密度 |
3.5 抗体特异性 |
3.6 基质效应评价 |
3.7 添加回收率 |
3.8 真实样品测定结果验证 |
第二节 基于单克隆抗体和噬菌体单链抗体的噻虫胺ELISA方法研究 |
2 实验方法 |
2.1 间接竞争酶联免疫吸附分析方法(ELISA)操作程序 |
2.2 免疫反应条件优化 |
2.3 标准曲线建立与交叉反应率测定 |
2.4 添加回收率测定 |
2.5 样品基质效应实验 |
2.6 真实样品分析 |
3 结果与分析 |
3.1 噻虫胺ELISA法条件优化 |
3.2 灵敏度 |
3.3 抗体特异性 |
3.4 基质效应评价 |
3.5 添加回收率 |
3.6 方法相关性验证 |
4 本章结论与讨论 |
第四章 噻虫胺化学发光酶免疫分析方法研究 |
1 实验材料与方法 |
1.1 实验材料 |
1.2 实验方法 |
2 结果与分析 |
2.1 化学发光发射波谱曲线和动力曲线 |
2.2 CLEIA法条件优化 |
2.3 灵敏度 |
2.4 特异性 |
2.5 添加回收率 |
2.6 真实样品测定结果验证 |
3 本章结论与讨论 |
第五章 噻虫胺时间分辨荧光免疫分析方法研究 |
1 实验材料与方法 |
1.1 实验材料 |
1.2 实验方法 |
2 结果与分析 |
2.1 铕标记物制备与纯化 |
2.2 荧光波谱 |
2.3 TRFIA法条件优化 |
2.4 灵敏度 |
2.5 特异性 |
2.6 添加回收率 |
2.7 真实样品测定结果验证 |
3 本章结论与讨论 |
第六章 量子点荧光免疫分析方法研究 |
1 实验材料与方法 |
1.1 实验材料 |
1.2 实验方法 |
2 结果与分析 |
2.1 量子点标记抗体的荧光波谱 |
2.2 FLISA条件优化 |
2.3 灵敏度 |
2.4 特异性 |
2.5 添加回收率与方法的精密度 |
2.6 实际样品检测和相关性验证 |
3 本章结论与讨论 |
第七章 噻虫胺荧光偏振免疫分析方法研究 |
1 实验材料与方法 |
1.1 实验材料 |
1.2 实验方法 |
2 结果与分析 |
2.1 荧光示踪物鉴定 |
2.2 FPIA法工作缓冲液条件优化 |
2.3 灵敏度 |
2.4 特异性 |
2.5 添加回收率 |
2.6 相关性验证 |
3 本章结论与讨论 |
第八章 噻虫胺金标试纸条免疫层析分析方法研究 |
1 实验材料与方法 |
1.1 实验材料 |
1.2 实验方法 |
2 结果与分析 |
2.1 胶体金颗粒鉴定 |
2.2 胶体金标记单克隆抗体 |
2.3 免疫层析分析优化 |
2.4 试纸条灵敏度 |
2.5 试纸条特异性 |
2.6 试纸条稳定性 |
2.7 基质效应评价 |
2.8 添加回收率 |
2.9 真实样品测定结果验证 |
3 本章结论与讨论 |
全文主要结论与讨论 |
参考文献 |
附录:缓冲液及培养液配制 |
攻读学位期间发表的学术论文和申请的专利与项目 |
致谢 |
(8)HBsAg/TP联合检测金标试纸条在献血者初筛中的应用(论文提纲范文)
1 材料与方法 |
1.1 主要试剂与仪器 |
1.2 献血者抗-TP检测及TPPA检测 |
1.3 HBs Ag/TP联合检测金标试纸条对梅毒抗体阳性标本的检测 |
1.4 对HBs Ag阳性标准品的检测 |
1.5 HBs Ag/TP联合检测金标试纸条对HBs Ag阳性标本的检测 |
1.6 HBs Ag/TP联合检测金标试纸条对抗-TP/HBs Ag混合阳性标本的检测 |
1.7 对阴性标本的检测 |
1.8 采血前应用HBs Ag/TP联合检测金标试纸条进行初筛后的效果分析 |
1.9 统计学分析 |
2 结果 |
2.1 HBs Ag/TP联合检测金标试纸条对梅毒抗体阳性标本的检测 |
2.2 HBs Ag/TP联合检测金标试纸条对HBs Ag检测的分析灵敏度 |
2.3 HBs Ag/TP联合检测金标试纸条对HBs Ag阳性标本的检测 |
2.4 HBs Ag/TP联合检测金标试纸条对TP/HBs Ag混合阳性标本的检测 |
2.5 HBs Ag/TP联合检测金标试纸条对阴性标本的检测 |
2.6 采血前常规应用HBs Ag/TP联合检测金标试纸条进行初筛后的效果分析 |
2.7 应用HBs Ag/TP联合检测金标试纸条进行初筛后抗-TP真阳性率变化 |
3 讨论 |
(9)胶体金法、ELISA法检测HBsAg在献血者初筛中的作用(论文提纲范文)
1 材料和方法 |
1.1 标本来源 |
1.2 仪器和试剂 |
1.3 方法 |
1.4 统计学处理 |
2 结果 |
3 讨论 |
(10)胶体金免疫层析法检测HBsAg在无偿献血中的应用(论文提纲范文)
1 对象与方法 |
1.1 调查对象 |
1.2 试剂 |
1.3 主要仪器 |
1.4 方法 |
1.4.1 金标法 |
1.4.2 ELISA法 |
1.4.3 |
2 结果 |
2.1 金标法检测HBs Ag的灵敏度 |
2.2 2010年-2011年无偿献血者HBs Ag检测结果 (见表1) |
3讨论 |
四、金标试纸条与ELISA法检测HBsAg的比较(论文参考文献)
- [1]旋毛虫ELISA检测方法的建立及其血清流行病学的应用研究[D]. 刘佳璇. 郑州大学, 2020(02)
- [2]机采血小板献血初筛使用乙肝表面抗原/梅毒螺旋体抗体试纸条对复检结果的影响[J]. 魏延民,孙波,高志刚,赵莉,张然. 江苏医药, 2018(04)
- [3]宁夏地区HBsAg/TP联合金标试纸条法的应用分析[J]. 张巧云,邵峰. 宁夏医学杂志, 2018(02)
- [4]两种金标试纸条能效比对及经济效益分析[J]. 黄伯泉,黄志健,王淏,姜津,杜荣松,李仲平,梁浩坚,谢君谋. 中国输血杂志, 2017(12)
- [5]无偿献血者献血前梅毒螺旋体抗体快速检测结果分析及策略优化[J]. 蔡县成,叶青,刘芳菲,洪智林. 国际检验医学杂志, 2017(13)
- [6]HBsAg/TP联合金标试纸条用于筛查街头无偿献血者的效果分析[J]. 黄腊梅,肖雯. 检验医学与临床, 2016(09)
- [7]噻虫胺抗体制备及免疫分析方法研究[D]. 李明. 南京农业大学, 2015(05)
- [8]HBsAg/TP联合检测金标试纸条在献血者初筛中的应用[J]. 陈长荣,欧山海,林永财,宋秀宇. 中国输血杂志, 2014(07)
- [9]胶体金法、ELISA法检测HBsAg在献血者初筛中的作用[J]. 谢云,冯惟萍,李国英. 甘肃医药, 2014(02)
- [10]胶体金免疫层析法检测HBsAg在无偿献血中的应用[J]. 王林. 中国卫生检验杂志, 2013(09)